揭示人類端粒DNA合成關鍵分子機制

　　近日，大連化物所所分子模擬與設計研究組（1106組）李國輝研究員團隊與上海交通大學醫學院精準醫學研究院雷鳴教授、武健教授團隊合作，在揭示人類端粒DNA合成關鍵分子機制研究方面取得新進展。

　　端粒是位于真核生物染色體末端的DNA—蛋白復合體，用于保護染色體在細胞分裂過程中的完整性。端粒的DNA會隨著細胞的每次分裂而逐漸縮短，一旦染色體末端端粒DNA消化殆盡，染色體將被降解或發生融合，細胞則會立即啟動凋亡機制。因此，端粒被認為與細胞衰老密切相關，是人類抗衰老研究的重點。

　　在細胞分裂的過程中，端粒酶也將被同時激活用于合成端粒DNA，以補償端粒在該過程中的損失。人類端粒酶是一種具有逆轉錄酶活性的多亞基核糖核蛋白復合物，其功能缺失與人類多種端粒綜合癥有關，例如先天性角化不良（dyskeratosis congenita, DC）和小腦發育不全綜合癥（Hoyrara Hreidarsson syndrome，HHS）等。在傳統逆轉錄酶合成DNA的過程中，引物DNA與RNA模版至少要保持6個以上堿基配對才能夠開啟DNA合成活性；而人類端粒酶僅需要3個堿基配對即可維持其端粒DNA的合成活性。

　　為了闡明上述重要過程的分子機理，本工作中，雷鳴和武健團隊通過單顆粒冷凍電鏡技術，解析了人類端粒酶全酶與端粒DNA引物和RNA模版雜合雙螺旋的復合體結構。結合這些結構信息及李國輝團隊深入的理論研究發現，人類端粒酶催化亞基中關鍵氨基酸Leu980在控制DNA-RNA雜合雙螺旋配對長度調控方面具有關鍵作用。Leu980扮演著類似拉鏈頭的作用，使底物DNA-RNA雜合雙螺旋相對分離，且僅保持3個堿基配對的雜合狀態。理論研究表明，將Leu980突變成Gly，可使DNA-RNA雜合雙螺旋形成更緊密的6堿基配對構象。后續生化實驗證實，Leu980Gly的突變將嚴重影響人類端粒酶持續和穩定的DNA合成能力。同時，理論方面動態結構信息分析表明，人類端粒酶中負責穩定雜合雙螺旋底物兩端手指結構域的反向協同構象互作，是端粒酶行使功能的重要結構特征。該工作為人類端粒酶重復合成端粒DNA的深入研究提供新的思路。

　　相關成果以“Zipper Head Mechanism of Telomere Synthesis by Human Telomerase”為題，于近日發表在《細胞研究》（Cell Research）上。該工作的共同第一作者是上海交通大學醫學院萬福堂博士后、中科院上海生化與細胞研究所丁勇博博士、我所1106組張躍斌副研究員、上海交通大學醫學院吳振芳副教授。上述工作得到國家自然科學基金、國家重點研發計劃等項目的支持。

　　文章鏈接： https://doi.org/10.1038/s41422-021-00586-7