支原體培養實驗——支原體半固體培養基接種法

實驗方法原理	一、標本采集支原體常侵及人和動物的粘膜表面，一般可用棉花拭子涂抹取樣后放入2~3 ml支原體液體培養基的小管中，或取其分泌液，若標本是組織塊，可在滅菌乳缽或玻璃勻漿后接種，取樣后應盡快接種培養。二、分離培養混種法：在制備半固體培養基時，培養基加熱溶化，溫度降至50℃時，添加動物血清、酵母浸液及青霉素后混勻，待冷卻至37~40℃時，用無菌滴管吸取標本0.5~1 ml加入培養基中，充分混勻，凝固后置37℃孵育。三、結果觀察絕大多數支原體為兼性厭氧，少數在含10% CO₂和相對濕度80~90%的大氣環境中生長良好。支原體生長緩慢，多數于3~4 d長出菌落，少數于1~2 w方長出典型菌落，在平皿固體培養基上生長的菌落呈"油煎蛋"狀，邊緣不整齊。
實驗材料	肺炎支原體
試劑、試劑盒	糖酵解培養基基礎培養基牛血清酵母浸液酚紅醋酸鉈青霉素
儀器、耗材	培養皿燒杯玻璃棒天平移液管離心機棉花拭子培養箱
其他	一、附錄糖酵解培養基（肺炎支原體培養基）基礎培養基 70 ml 馬（或牛血清） 20 ml 25%酵母浸液 10 ml 0.4%酚紅 0.5 ml 1%醋酸鉈 2.5 ml 青霉素10000 IU/ml 5.0 ml 調pH 7.8 展開