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  • 發布時間:2019-11-03 16:17 原文鏈接: 支原體CCU測定

    丁香園網友“園中木”要做支原體CCU,而不知道這個初始菌液的濃度如何選,因缺少標準的0.5麥氏濃度,所以比較困惑,看了相關文獻有說將其定量到10的6次方左右,但又是如何定量的呢?

    網友“ljksbs”問答:這個我以前做過,只能用倍比稀釋法:取12只無菌試管,每管預先加入1.8ml支原體選擇性液體培養基,在第一管中加入0.2ml待測菌液,充分混勻后從第一管吸出0.2ml液體加入第二管,再混勻,吸出0.2ml加入第三管,依次類推,到最后一管,放入30度培養,CCU的定值以最后一管出現顏色改變作為,即如果第五管發生顏色改變為最后一管,此CCU為10的5次方/ml.如果第六管顏色改變為最后一管,為10的6次方/ml。

    由于支原體的液體生長是以顏色改變作為生長想象觀察,其生長后的液體培養基仍然是澄清透亮的,只是顏色發生變化,不像大多數細菌液體是混濁的,因此用測OD值定量是行不通的.當然從理論上說固體的cfu平板澆注發也是可以行得通的,但是支原體的菌落很小,一般觀察要在低倍鏡下觀察,照成研究人員的主觀觀察難度,易出現主觀誤差.因此支原體較好的定量方法還是倍比稀釋的CCU較為簡單可行,也是常用的.。


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