競爭性RIA，又稱傳統RIA
主要特點：標記的是抗原。其原理：未知抗原Ag+標記抗原Ag +已知定量抗體Ab標記抗原與抗體復合物AgAb+未知抗原與抗體復合物Ag Ab+游離標記抗原Ag （去除）（未知抗原多，標記抗原與定量抗體結合的復合物就少，表現為負相關）。
臨床上甲胎蛋白（AFP），癌胚抗原（CEA），8 一微球蛋白（pz—MG ），鐵蛋白（Fer），人絨毛膜促性腺激素p亞單位（HCG-13）等的檢測都是競爭性RIA法原理。競爭性RIA法，根據加樣順序與溫育次數的區別，反應方式分三種：平衡法，將非標記抗原（被測物與標準品）、抗體、標記抗原依次加入反應管，混勻后一次性溫育至反應達到動態平衡，再加分離劑分離B（復合物）與F（游離物）如：AFP，8 一MG，Fer；順序加樣法，先將非標記抗原（被測物與標準品），與抗體在反應管內作第一次溫育，待反應達到動態平衡后。加入標記抗原，再作第二次溫育后，分離B與F如：CEA；急診檢測法：為臨床急需檢測結果而提出的反應方式，不等RIA 反應達到動態平衡就終止反應；分離劑的選擇有，PEG（聚乙二醇），第二抗體等。
現在一般采用的是：第二抗體與PEG合用的方法，稱為雙抗體一PEG法。
PEG原理：PEG濃度達到7 一9 時能使抗原一抗體復合物沉淀。
優點：經濟，簡便，通用。
缺點：重復性差，非特異性結合率高。
第二抗體：第一抗體是可與被測抗原進行特異結合的抗體，來自家兔或豚鼠。用第一抗體為抗原，作用到羊，馬身上，產生的抗第一抗體的抗體稱第二抗體。第二抗體與第一抗體在適當條件下發生特異性結合，生成分子量很大的免疫復合物（AgAb ×Ab ），能自然沉淀。
優點：分離效果好。非特異性結合率低。
缺點：增加經費投入。需要第二次溫育，延長了時間。
所以就產生了兩者合用的雙抗體一PEG法，它結合了上述兩種方法的優點。