散瞳藥物的作用機制是通過阻斷乙酰膽堿對瞳孔括約肌的作用，從而使瞳孔擴大。乙酰膽堿是一種神經遞質，它在神經系統中起著傳遞信號的作用。在眼部，乙酰膽堿由副交感神經釋放，作用于瞳孔括約肌，使其收縮，從而使瞳孔變小。
散瞳藥物通過與乙酰膽堿受體競爭性結合，阻斷乙酰膽堿的作用，從而使瞳孔括約肌松弛，瞳孔擴大。不同的散瞳藥物對乙酰膽堿受體的親和力和作用時間有所不同，因此其散瞳效果和持續時間也會有所差異。
