近期專家及民眾對2019-新型冠狀病毒核酸陽性檢出率低、咽拭子屢次陰性、核酸檢測與臨床診斷不吻合等問題提出各種觀點或疑惑。回顧近三年我們對呼吸道感染患兒不同取材部位多種呼吸道病原體檢出率的研究，供大家參考，希望對2019-新型冠狀病毒核酸檢測有所指導，對臨床醫生選擇采樣位置以及解讀結果有所啟示，對民眾理解疾病診治和防控有所幫助。
1、痰樣本檢出病原體種類顯著高于咽拭子[1]
我們在2018年1-7月對1-13歲440例下呼吸道感染住院患兒，采集抽吸痰（下呼吸道部位）與口咽拭子（上呼吸道）配對樣本（采集時間間隔小于1小時），使用多重PCR技術檢測11種常見呼吸道病原體核酸（甲流、乙流、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、鼻病毒、腺病毒、偏肺病毒、博卡病毒、冠狀病毒[含229E、OC43、NL63、HKU1]、肺炎支原體和衣原體），比較兩種類型樣本檢出差異。
結果顯示痰樣本11種病原體總體陽性率略高于咽拭子（88%vs. 84%），大部分呼吸道病毒在兩種標本中陽性率一致，而痰樣本中支原體陽性率顯著高于其配對咽拭子（100%vs. 45%）。在檢出結果不一致的配對樣本，痰樣本中檢出病原體類型顯著多于咽拭子樣本病原體類型（16.1vs. 3.6%）。研究提示下呼吸道感染患兒痰樣本檢出病原體種類高于咽拭子。
2、難治性肺炎支原體肺炎患兒病原體檢出率與病程有一定關系[2]
對接受纖維支氣管鏡灌洗治療的難治性肺炎支原體肺炎（RMPP）患兒采用多重PCR、熒光定量PCR技術和被動凝集法分別檢測痰、肺泡灌洗液核酸以及血清肺炎支原體抗體。我們發現熒光定量PCR檢測肺泡灌洗液病原體陽性率與病程顯著相關，即隨著病程進展，熒光定量PCR檢測肺泡灌洗液核酸持續陽性，而痰核酸陽性率、抗體陽性率與病程長短不相關。提示臨床對于存在肺部大面積損傷且常規大環內酯類抗生素治療7天仍未好轉的患者，外周血抗體轉陰、痰樣本核酸轉陰時，仍應關注肺泡灌洗液內的病原體核酸檢測結果。
2020年2月11日，深圳病原與免疫重點實驗室等單位[3]聯合研究“評價不同呼吸道標本在2019-冠狀病毒感染實驗室診斷和病毒脫落監測中的準確性”，發現在發病后的第一個14d，除支氣管肺泡灌洗液(BALF)外，痰標本陽性率最高(74.4%~88.9%)，其次為鼻拭子(53.6%~73.3%)；在發病后的第15d，痰和鼻拭子仍有較高的陽性率（42.9%~61.1%）；發病后8d采集的咽拭子陽性率較低，輕型病例咽拭子陽性率較低；重癥患者下呼吸道均可檢測到病毒RNA，輕度患者未檢測到病毒RNA；BALF中病毒RNA的檢測對于嚴重病例的病毒診斷和監測是必要的。
由此可見，病原體核酸檢測應充分考慮采集不同的樣本類型、采集部位、采集時期、病程及疾病嚴重程度。
因新型冠狀病毒傳染性強，不適合做大樣本臨床觀察及實驗，希望我們既往對病原體核酸檢測對比研究結果能為新型冠狀病毒感染的診斷與防控提供參考。
【參考文獻】
1.Comparing the yield of oropharyngeal swabs and sputum for detectionof
11 common pathogens in hospitalized children with lowerrespiratory tract
infection
2．《3種方法檢測兒童肺炎支原體感染的臨床評估》
3．Evaluatingthe accuracy of different respiratory specimens in the
laboratorydiagnosis and monitoring the viral shedding of 2019-nCoV
infections