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  • 發布時間:2019-03-02 20:15 原文鏈接: 新型PCR分析方法毛細管PCR技術

    新型PCR分析方法毛細管PCR技術

     

    常規PCR反應采用導熱性較差的塑料管作為反應容器,對于100~1樣品,樣品溫度要比槽板溫度滯后2030s,加上槽板升降溫度較慢(1C/s),因此30個循環反應通常需要2~6h,循環時間多浪費在常規PCR反應采用導熱性較差的塑料管作為反應容器,對于100~1樣品,樣品溫度要比槽板溫度滯后20—30s,加上槽板升降溫度較慢(1’C/s),因此30個循環反應通常需要2~6h,循環時間多浪費在加熱和冷卻樣品過程中,不能滿足臨床快速診斷的需要。

    毛細管PCR由于采用導熱性遠強于塑料管的毛細管作為反應容器,使得樣品溫度滯后時間小于1s,對于擴增500bp的片段,延伸反應10s就可完成;對于 10/A1的樣品,變性和復性均能在1s內完成;另外,毛細管PCR儀采用高速空氣流作為加熱和冷卻的介質,保證了溫度的均一性、溫度的迅速變化及樣品和 空氣間的快速熱傳導,使得樣品溫度變化率可達5~10~C/s,因此毛細管PCR儀能夠在短至15min內完成30個循環。而儀器方面則出現了相應的附件 用于承載裝有樣品的毛細管。

    目前,PCR的發展主要集中在擴增條件的完善、擴增產物檢測方法的改進和擴增產物由定性分析向定量分析轉變上。


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