原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/9/507617.shtm
近日,中國科學院廣州生物醫藥與健康研究院研究員李志遠團隊開發出一種基于CRISPR/Cas系統的新型檢測方法CAMURE(多模態通用報告器),通過應用于檢驗葡萄球菌腸毒素A標志物,驗證了CAMURE比DETECTR檢測具有更高的靈敏度和特異性。相關成果發表于analytical chemistry。
金黃色葡萄球菌是一種常見的食源性致病微生物,其產生的葡萄球菌腸毒素(SEs)具有高熱穩定性和蛋白酶抗性。常用的檢測SEs的方法為免疫分析法和聚合酶鏈反應法,但這兩種方法周期長、成本高昂、易受儀器限制,不利于大范圍推廣應用。
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CAMURE檢測原理。研究團隊 供圖
該研究揭示了一種基于Cas12a的CAMURE。使用新開發的CAMURE檢測葡萄球菌腸毒素,檢測結果顯示其與已報道的傳統報告器相比增強了10倍的靈敏度,并且配合多模式讀數,可以傳達出與傳統報告器相同的診斷結果。同時,CAMURE可以通過簡單地重新編程引導RNA來檢測所有基因編碼的SEs,也可以應用于其他感染和疾病生物標志物的檢測。
該研究還進一步提出一種快速的DNA提取方法,通過使用Triton X-100溶液在2-5分鐘內從牛奶樣品中提取出高質量的DNA,而無需使用商業提取試劑盒,該方法能夠擴展到其他基因編碼的疾病標志物檢測。
該研究為快速準確檢測葡萄球菌腸毒素提供了新方案,并且為更多病原菌的檢測提供了可能。據悉,該技術能夠有效整合到當地衛生保健系統中,將其影響擴大到衛生條件落后的人群。尤其在先進實驗基礎建設有限的地區,即時診斷在改革醫療保健方面有巨大的前景。
該方法可以通過重新設計crRNA來檢測其他基因編碼的腸毒素和其他感染和疾病標志物,包括傳染性和非傳染性的病原體和癌癥篩查,具有廣泛的臨床和生物應用價值。
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