新霉素為氨基糖甙類廣譜抗生素，對革蘭陰性菌、陽性菌及結核桿菌等都有較好作用。以大腸桿菌最敏感，對金葡菌、炭疽桿菌、白喉桿菌、產氣桿菌、變形桿菌及痢疾桿菌等較敏感，對綠膿桿菌較不敏感。細菌對藥品和鏈霉素、卡那霉素、慶大霉素之間可發生交叉耐藥性。臨床上由于本品毒性大，一般不作注射給藥，僅用于口服及局部應用。口服吸收很少，可用于治療腹瀉，對大腸桿菌引起的小兒腹瀉療效較好。亦可用于腹部及腸道手術前用藥。局部應用療效也較好，對敏感菌所致的皮膚粘膜感染如膿瘡、癤、潰瘍及燒傷等效果都好。
