方案11.1玻璃器皿的準備和滅菌

消毒劑（次氯酸鹽） 清潔劑

浸泡池 試管刷 不銹鋼籃子 鋁箔 無菌指示器 無菌指示膠帶或塞 滅菌烤箱

一、玻璃器皿的收集和清洗

1. 玻璃器皿用后要立即將其收集到含有消毒劑（次氯酸鹽，用清潔劑稀釋，最少應含有300 μg/g 的氯，如常規用的次氯酸鈉）
的清潔劑（如，7× 或Decon）中。在浸泡或清洗前絕不能讓玻璃器皿變干，否則會非常難清洗。

2. 在清潔劑中浸泡過夜。

3. 漂洗：

(a) 次日早，用試管刷手工刷洗或機器刷洗玻璃器皿，自來水沖洗 4 次后用去離子水沖洗 3 次。保持水流噴射非常有必要，否則每次都要將瓶子裝滿后再倒空。將許多瓶子固定在籃子中會使沖洗速度加快。

(b) 機器清洗不需要清潔劑。如果接一個龍頭，則可減少兩次自來水沖洗和一次去離子水沖洗的過程。

4 . 在徹底沖洗之后，將瓶子倒置在不銹鋼籃子（盛放漂洗過的玻璃器皿然后晾干）中烘干。

5 . 冷卻后用鋁箔封口保存。

二、玻璃器皿的消毒

1. 在玻璃器皿上貼上小正方形的無菌指示膠帶（這與高壓滅菌器中的無菌指示膠帶不同 ，因為烤箱中的溫度更高。大多數高壓滅菌器中的無菌指示膠帶會烤焦，黏合劑中的易爆炸成分就會殘留在烤箱和玻璃器皿中。）或其他的指示標簽，并寫上日期。

2. 將玻璃器皿放人烤箱（在有風扇的情況下溫度可以達到160°C ，宜使用可記錄溫度計和易彎曲的探針）中，烤箱應有可循環空氣的風扇，并將溫度設定在 160°C 。

3. 確保烤箱的中央溫度達到160°C：

(a) 將一個無菌指示器（Alpha Medical 適用于干熱或蒸汽消毒，Thermalog 指示器只適用于蒸汽消毒）放人瓶中或其他器皿內，置于烤箱中央。

(b) 如果用可記錄的麵計，將感應部分放入瓶中或其他器皿內，符于烤箱中央。

(c) 不要將物品堆得過緊，要留出熱空氣對流的空間。

4. 將烤箱蓋好，檢杳溫度旋鈕是否在 160°C ，用膠帶將烤箱封好并按預定時間保持 1h (或用自動鎖和自動記錄儀）。

5. 1h 后將電源關掉，不開箱冷卻。如果有自動計時器則非常方便，因為它晚上能自動斷電，次日早就可以繼續實驗。這樣做可使冷卻在無菌的環境中進行，也使白天產生的熱量降低到最少。

6 . 消毒的玻璃器肌要在 24~48h 內使用。

1. 有機物要放在烤箱外面。不要用紙質的膠帶或包裝材料，除非你能確定其加熱時不會產生爆炸性物質。這些物質最終會留在烤箱中，加熱時會產生氣味，有的會殘留在消毒過的玻璃器皿中。

2. 用 121°C高壓滅菌20min，要經過一個前真空和后真空的循環，可以將瓶子的螺口蓋松開或用鋁箔包住口后再用高壓滅菌膠帶粘住。待冷卻后，再將松開的瓶蓋擰緊。在高壓滅菌的過程中，瓶蓋應擰得非常松（擰一圈即可），這樣做是為了讓蒸汽進人瓶中，也能阻止墊片（如果有）被瓶蓋吸住而堵住瓶口。在高壓滅菌器的滅菌過程中如果瓶口被堵住，會導致滅菌不完全。不幸的是，在高壓滅菌過程中經常會出現薄霧，在薄霧蒸發的過程中會在瓶中留有殘留物。同時瓶子在密封之前，冷卻的時候也可能被未消毒的空氣所污染。干熱滅菌相對好一些，因為它可以使瓶子在移動之前在烤箱中直接冷卻。