細胞培養中的無菌技術
無菌技術事細胞培養中,十分重要的一個環節。保持實驗無菌性、防止污染對于保證細胞狀態、維持實驗結果的完整性和穩定性而言,都有著重要意義。污染會嚴重影響實驗結果,危及整個實驗的完整性。
什么是無菌技術
細胞實驗過程中的污染,來源廣泛,包括空氣污染物、被污染的介質或試劑等。不正確的實驗操作也會導致污染。因此,在細胞培養過程中,每個實驗步驟中的“無菌技術”,就變得很有意義。
無菌技術是一套防止微生物(包括細菌、病毒、真菌、支原體等)污染生物樣品或培養物的操作方法。這些技術一定程度上保證實驗不受有害微生物的影響,以提高實驗結果的質量。
無菌技術有哪些?
1、設備的清潔與滅菌
在開始任何細胞培養實驗之前,必須對所有設備、耗材和試劑進行滅菌處理,當然,我們推薦實驗人員盡量選擇商品化的無菌試劑。
滅菌方法包括高壓滅菌、過濾、紫外線照射、乙醇噴灑或擦拭、消毒清潔試劑噴灑或擦拭等。
2、環境的清潔與滅菌
所有細胞培養工作應在無菌和清潔的環境中進行。因此要對實驗環境進行清潔與滅菌。
包括實驗前對實驗空間定期清潔,包括桌面、地面、墻面、生物安全柜操作臺等,開始實驗前,還應打開生物安全柜中的紫外線燈進行照射滅菌。
除了常規的消毒試劑,這里推薦使用德國Minerva Biolabs的Mycoplasma-off支原體祛除噴霧劑,不僅對支原體起作用,還能高效清除并預防細菌、真菌等污染物。
3、正確處理實驗材料
正確處理實驗材料,實驗操作應符合相關規定、避免交叉污染。包括佩戴適當的個人防護設備,如手套、口罩;及時更換移液器一次性器具等操作。
4、實驗室合理布局
在實驗過程中,嚴格遵守實驗室中物品擺放準則,以培養箱舉例:培養皿擺放密度應合理,宜少不宜多等。
5、定期監測培養物
定期監測培養物,對于及早發現和解決而言,也是一個關鍵點。這包括在顯微鏡下檢查培養物狀態、肉眼觀察培養基的形態、顏色等變化等。必要時可以使用PCR技術定期測試微生物污染的存在。
德國Minerva Biolabs Venor? Gem Classic支原體檢測試劑盒,用于常規實驗中支原體的檢測;如果需要進行項目申報等流程,需要嚴格的方法學驗證,可以使用德國Minerva Biolabs Venor? Gem qEP,支原體qPCR檢測試劑盒,通過《歐洲藥典》和《日本藥典》的方法學驗證,方便快捷、準確率高。
總結
總之,在細胞培養過程中保持無菌條件是保證實驗結果準確可靠的必要條件。遵循適無菌技術,定期監測培養,并采取必要的預防措施來防止污染,可以顯著降低細胞培養中生物污染的風險。
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