無血清快速細胞凍存液操作說明

無血清快速細胞凍存液，通用于各種動物細胞株。特別配方具有有效提高細胞凍存活率和復蘇活力。不含動物來源性蛋白，能減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染，確保凍存細胞安全。既適用于一般培養細胞的凍存，也適用于無血清培養細胞和蛋白表達細胞的凍存。

產品特色

1. 高安全性，完全使用醫藥品等級原料進行生產，不含動物成分，病毒、霉菌和支原體等污染可能性低，各批產品之間有更高的產品質量一致性。

2.細胞存活率高，無批次差異。

3.完全凍存液配方，可直接使用，方便簡捷，可直接存放于-80℃冰箱凍存，無需經過費時的程序降溫過程（省時、省力、省錢）。

凍存液成分

無血清細胞，無血清干細胞及MSC凍存液

保存條件

儲存于4℃以下。質量保障期從產品的生產日期起，為期3年。3個月以上沒有使用凍存液計劃時，盡可能冷凍保存。為避免重復凍融過程可能導致的凍存液品質下降和性能降低，推薦將100 ml產品分裝小瓶后，再存放于4℃以下或-20℃冰箱凍存。

使用方法

細胞冷凍保存方法

選擇凍存處于對數生長期的細胞有助于提高復蘇細胞存活率。

1. 按照常用方法收集懸浮細胞或貼壁細胞于試管中。

2.按照培養細胞密度和所用細胞凍存管的尺寸計算所需凍存細胞數。

（參考：5×105至5×106 cells/ml）。

3.取相當于所需細胞數的細胞懸浮液量，置于離心管中，離心收集培養細胞（參考離心條件：1,000~2,000 rpm，4℃，3~5 min）。移去離心管中的上清液。

4.加入適量的無血清型細胞凍存液于離心管中，使細胞濃度為5×105至5×106 cells/ml。緩慢地混合均勻，制成細胞混合液。

5.將離心管中的細胞混合液分裝于已標示完全的冷凍保存管中。

6.直接將含細胞混合液的凍存管放入-80℃冰箱，長期冷凍保存。

7.若研究者需要液氮保存時，可將完全凍結的凍存管（放入-80℃冰箱后至少一晝夜）移至-196℃液氮罐。

凍存細胞復蘇方法

1. 從冰箱里取出細胞冷凍保存管，立即放入37℃振動水浴槽中快速解凍。

2.待凍存管中細胞混合液完全融化后，立即加入1 ml細胞培養基于該冷凍管中與細胞混合，再將細胞混合液從凍存管中移入含有9 ml該細胞培養基的試管中，混合均勻。

3.離心收集培養細胞（參考離心條件：1,000~2,000 rpm，4℃，3~5 min），移去上清液。

4.清洗細胞，充分洗凈殘留凍存液。

5.加入適量的新鮮細胞培養基，使用移液管緩緩地均勻細胞混合液。適量地稀釋后，將細胞混合液移至事先準備好的培養瓶中。

6.鏡檢后，研究者可根據各自方法和需要來進行細胞培養。

復蘇細胞存活率

● 最好用處于對數生長期的細胞進行凍存。
● 控制好胰酶的消化時間，切記消化過度，會影響細胞復蘇效果。
● 重懸細胞的過程中，請務必要輕柔，以免損傷細胞，但同時也一定要充分重懸，這樣細胞在復蘇時才不會成團。
● 細胞操作請注意無菌