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  • 顯微鏡檢查與干化學試紙條檢測尿紅、白細胞臨床應用探討


           自1956年,在Dr Alfed Helen Free領導下,開創了“浸與讀”(dip and read)干化學法的新紀元,經近半個世紀發展,多聯式試紙條相繼問世配合尿液分析儀廣泛進入實驗室,為尿液化學成份檢查提供快捷、可靠、客觀的結果,成為尿液分析重要的組成部分。然而,因尿干化學檢查法在檢測原理上有一定的局限性、部分使用者對儀器缺乏深入了解、以及尿液易受物理、化學、藥物、生物等因素干擾,影響檢測結果的準確性,造成誤診和漏診,特別是與臨床關系最為密切的隱血,白細胞酯酶2項。為此,本文采用3種鏡檢法和2種干化學試紙條對臨床尿液樣本進行分析,探討其誤診率和漏診率。

           材料和方法

           一、材料

    1.器材
    1.1 Diasys R/S 2003尿沉渣定量分析工作站(美國,Diasys corporation 生產)。
    1.2 Clinitek-500型尿液分析儀(德國Bayer公司生產)。
    1.3 Miditron?尿液分析儀(德國Beobringer mannheim公司生產)。
    1.4 載玻片。
    1.5 蓋玻片(18×18mm)。
    2.試劑
    2.1 MultistixTM 10 SG 試紙條(原廠配套)。
    2.2 combur 10 Test? M 試紙條(原廠配套)。
    2.3 生理鹽水。
    2.4 5%次氯酸鈉溶液。
    2.5 尿沉渣染色液(廣州華鑫科技有限公司提供)。
    3. 標本采集:按NCCLS Literature GP 16-A[1]要求用一次性潔凈塑料杯隨機采集門診、住院病人新鮮中段尿共1 236份(其中男性721份,女性515份),年齡2~85歲。采集后立即送檢。

           二、方法

    1.檢測方法

    1.1 R/S 2003 尿沉渣定量Diasys分析工作站法[2](簡稱工作站法)。按廠商提供操作手冊進行。
    1.2 過篩法:吸取混合尿20μl,滴于載玻片上,加上18×18mm 蓋玻片,用10×40高倍鏡觀察左、右、上、下、中各2個視野,共10個視野。以“+”號或最低值~最高值/HPF報告。
    1.3 非染色尿沉渣鏡檢法[3](簡稱離心法),按全國臨床檢驗操作規程進行。
    1.4 干化學法:分別按廠商提供的Clinitek-500型尿液分析儀和Miditron尿液分析儀操作手冊,用原廠配套試紙條進行檢測。

    2.結果判斷

    2.1 工作站法:混合尿紅細胞0~2個/μl為陰性,>3個/μl為陽性,混合尿白細胞0~3個/μl為陰性,>4個/μl為陽性。
    2.2 過篩法[4]:混合尿紅細胞0~2/HPF為陰性,>3個/HPF為陽性,混合尿白細胞0~3/HPF為陰性,>4個/HPF為陽性。
    2.3 離心法:混合尿紅細胞0~3個/HPF為陰性,>4個/HPF為陽性;混合尿白細胞0~5個/HPF為陰性,>5個/HPF為陽性。
    2.4 干化學法:按操作手冊標示范圍確定其陰性及陽性程度。

    3. 計算

    以顯微鏡下計數紅、白細胞為標準與干化學法中檢測隱血,白細胞酯酶的結果比較,按下分組及計算[5]:

    (a) 顯微鏡檢法陽性,干化學法陽性為真陽性;
    (b) 顯微鏡檢法陰性,干化學法陽性為假陽性;
    (c) 顯微鏡檢法陽性,干化學法陰性為假陰性;
    (d) 顯微鏡檢法陰性,干化學法陰性為真陰性;
    假陽性率(誤診率)%=b/b+d×100
    假陰性率(漏診率)%=c/a+c×100
    陽性符合率(%)=a/a+c×100
    陰性符合率(%)=d/b+d×100

           結 果

    一、同一樣本用過篩法、離心法、工作站法(鏡檢)和MultistixTM 10 SG、combur 10 Test? M試紙條檢測尿紅、白細胞結果(見表1) (略)

    二、同一樣本用過篩法、離心法、工作站法(鏡檢)和MultistixTM10 SG、combur 10 Test? M試紙條檢測尿紅、白細胞結果(見表2)。



    三、本文資料與國內文獻比較,用于化學檢測尿紅、白細胞的誤診率及漏診率非常接近(見表3)。

           討 論

           尿液干化學檢查隱血和白細胞酯酶出現陽性結果時必需經顯微鏡檢查確證,以排除假陽性和假陰性,事實上,干化學法檢測隱血和白細胞酯酶的假陽性率、假陰性率是相當高的,臨床常因實驗室提供錯誤信息而導致誤診或漏診。本組資料顯示:以鏡檢法為標準,評價2間不同廠商生產的干化學試紙條,其檢測隱血的符合率為46.2%~55.2%,檢測白細胞酯酶符合率為45.0%~53.3%。比較MultistixTM10 SG和combur 10 Test? 2間不同廠商生產試紙條檢測隱血、白細胞酯酶的結果,前者假陽性率(誤診率)高于后者,而假陰性率(漏診率)卻低于后者,提示與試墊及儀器檢測的靈敏度有關。從表3得知:不同鏡檢方法降低試紙條的誤診率和漏診率的幅度是有差異的,用標準化尿沉渣鏡檢方法能提高試紙條檢出符合率。本文資料與國內文獻報告同一方法比較,誤診率和漏診率相仿。需要指出的是:本組1 236例用工作站法檢測隱血漏診率31.5%,白細胞酯酶漏診率30.3%,分別高于誤診率的1.7倍和1.8倍,值得關注。

           鑒于影響尿干化學測定因素頗多,出現假陽性,假陰性率高,且為半定量分析,因此,僅能作為“過篩”檢查。部分單位把干化學分析結果作為尿液分析結果發出報告的做法是錯誤的,必須予以糾正。建議:必須按標準化要求、規范化做好尿液分析中理學/外觀,化學,顯微鏡等項檢查,以保證尿液分析質量。

           參 考 文 獻

    1 中國臨床檢驗標準專業委員會.尿液分析和尿液樣本的收集、運輸及儲存;批準指南.(CCLS 臨床標準,2001.12.)
    2 Diasys Corporation.Instruction Manual & Technical specification R/S 2003.U.S.A,2001.
    3 葉應嫵,王毓三.全國臨床檢驗操作規程.第二版.江蘇:東南大學出版社,1997.133.
    4 李滌生,陳宏礎,石自明,等.臨床檢驗基礎.北京:人民衛生出版社,1993.188.
    5 洪明晃.設計測量評價.廣州:廣州醫學院,1998.11.
    6 許建邦,鄧小燕.尿液分析檢查標準化.合肥:安徽省臨床檢驗中心,2003.5.


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