普魯卡因青霉素

性狀

本品為白色結晶性粉末;遇酸、堿或氧化劑等即迅速失效。本品在甲醇中易溶,在乙醇中略溶,在水中微溶。比旋度取本品,精密稱定,加水-丙酮(2:3)溶液溶解并定量稀釋制成每1m中約含10mg的溶液,依法測定(通則0621),比旋度為+165°至+180°

鑒別

(1)照薄層色譜法(通則0502)試驗。溶劑丙酮-水(2:3)供試品溶液取本品適量,加溶劑溶解并稀釋制成每1ml中約含5mg的溶液。對照品溶液(1)取鹽酸普魯卡因對照品適量,加溶劑溶解并稀釋制成每1m1中約含2mg的溶液。對照品溶液(2)取青霉素對照品適量,加溶劑溶解并稀釋制成每1m1中約含3mg的溶液。色譜條件采用硅膠G薄層板,以丙酮-15.4%醋酸銨溶液(2:3)(用濃氨溶液或冰醋酸調節pH值至7)為展開劑。測定法吸取供試品溶液、對照品溶液(1)與對照品溶液(2)各5μl,分別點于同一薄層板上,展開,晾干,置碘蒸氣中顯色。結果判定供試品溶液所顯兩主斑點的位置和顏色應分別與相應對照品的主斑點的位置和顏色相同。(2)在含量測定項下記錄的色譜圖中,供試品溶液兩個主峰的保留時間應與對照品溶液兩個主峰的保留時間一致(3)本品的紅外光吸收圖譜應與對照的圖譜(光譜集511圖)一致以上(1)、(2)兩項可選做一項。

檢查

酸堿度取本品,加水制成每1ml中約含60mg的懸浮液,依法測定(通則0631),pH值應為5.0~7.5。甲醇溶液的澄清度與顏色取本品5份,各0.30g,分別加甲醇5ml溶解后,溶液應澄清無色;如顯渾濁,與1號濁度標準液(通則0902第一法)比較,均不得更濃;如顯色,與黃色或黃綠色2號標準比色液(通則0901第一法)比較,均不得更深有關物質照高效液相色譜法(通則0512)測定。臨用新制供試品溶液取本品70mg,精密稱定,置50ml量瓶中,加流動相A溶解并稀釋至刻度,搖勻對氨基苯甲酸貯備液取對氨基苯甲酸對照品16.80mg,精密稱定,置50ml量瓶中,加流動相A溶解并稀釋至刻度,搖勻,精密量取5m1,置50ml量瓶中,用流動相A稀釋至刻度,搖勻。對照溶液分別精密量取供試品溶液1m與對氨基苯甲酸貯備液2ml,置同一100ml量瓶中,用流動相A稀釋至刻度,搖勻。系統適用性溶液取青霉素、鹽酸普魯卡因和青霉素系統適用性對照品各適量,加對氨基苯甲酸貯備液溶解并稀釋制成每1ml中分別含0.50mg、0.15mg和0.80mg的混合溶液。色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以緩沖液(取磷酸二氫鉀14g和40%氫氧化四丁基銨溶液6.5g,溶解于約700ml水中,用1mol/L氫氧化鉀溶液調節pH值至7.0,用水稀釋至1000ml,混勻)-水-乙腈(52:28:20)為流動相A;以上述緩沖液(pH7.0)-水-乙腈(52:18:30)為流動相B,先以流動相A等度洗脫,待普魯卡因洗脫完畢后立即按下表進行線性梯度洗脫;檢測波長為225nm;進樣體積10l。時間(分鐘)流動相A(%)流動相B(%)00系統適用性要求系統適用性溶液色譜圖中,青霉素應在25分鐘內洗脫,除青霉素、普魯卡因和對氨基苯甲酸外,應檢出一個較大的青霉素主要雜質,出峰順序為對氨基苯甲酸、普魯卡因、青霉素主要雜質、青霉素。對氨基苯甲酸峰與相鄰雜質峰、普魯卡因峰與青霉素主雜質峰、青霉素峰與相鄰雜質峰間的分離度均應符合要求測定法精密量取供試品溶液與對照溶液,分別注入液相色譜儀,記錄色譜圖。限度供試品溶液色譜圖中如有雜質峰,對氨基苯甲酸峰面積不得大于對照溶液的對氨基苯甲酸峰面積的0.5倍(0.024%),其他單個雜質峰面積不得大于對照溶液的青霉素峰面積(1.0%)青霉素聚合物照分子排阻色譜法(通則0514)測定。臨用新制供試品溶液取本品約0.3g,精密稱定,置10ml量瓶中,加N,N-二甲基甲酰胺2ml使溶解,用水稀釋至刻度,搖勻。對照溶液取青霉素對照品適量,精密稱定,加水溶解并定量稀釋制成每1ml中約含0.1mg的溶液。系統適用性溶液(1)取藍色葡聚糖2000適量,加水溶解并制成每1ml中約含0.1mg的溶液。系統適用性溶液(2)取普魯卡因青霉素約0.3g,置10ml量瓶中,先加入N,N二甲基甲酰胺約2ml使完全溶解,再用0.1mol/L藍色葡聚糖2000溶液稀釋至刻度,搖勻色譜條件用葡聚糖凝膠G10(40~120m)為填充劑;玻璃柱內徑1.0~1.4cm,柱長30~40cm;流動相A為pH7.0的0.03mol/L磷酸鹽緩沖液[0.03mol/L磷酸氫二鈉溶液-0.03mol/L磷酸二氫鈉溶液(61:39)],流動相B為水;流速為每分鐘1.5ml;檢測波長為254nm;進樣體積100~200l系統適用性要求系統適用性溶液(1)分別在以流動相 A與流動相B為流動相記錄的色譜圖中,按藍色葡聚糖2000峰計算,理論板數均不低于400,拖尾因子均應小于2.0,藍色葡聚糖2000峰的保留時間比值應在0.93~1.07之間。系統適用性溶液(2)在以流動相A為流動相記錄的色譜圖中,高聚體的峰高與單體和高聚體之間的谷高比應大于2.0。對照溶液色譜圖中主峰與供試品溶液色譜圖中聚合物峰,與相應色譜系統中藍色葡聚糖2000峰的保留時間的比值均應在0.93~1.07之間。以流動相B為流動相,精密量取對照溶液連續進樣5次,峰面積的相對標準偏差應不大于5.0%。測定法以流動相A為流動相,精密量取供試品溶液注入液相色譜儀,記錄色譜圖;以流動相B為流動相,精密量取對照溶液注入液相色譜儀,記錄色譜圖。限度按外標法以青霉素峰面積計算,青霉素聚合物的量不得過青霉素的0.20%。殘留溶劑照殘留溶劑測定法(通則0861第二法)測定。內標溶液稱取丙醇適量,用N,N-二甲基甲酰胺溶解并稀釋制成每1ml中約含3mg的溶液供試品溶液取本品約1.0g,精密稱定,置頂空瓶中,分別精密加人內標溶液1.0ml、N,N-二甲基甲酰胺4.0ml,密封,搖勻。對照品溶液取乙酸乙酯和正丁醇適量,精密稱定,加N,N-二甲基甲酰胺定量稀釋制成每1m中約含乙酸乙酯和正丁醇各0.625mg的溶液。精密量取4.0m1,置頂空瓶中,再精密加人內標溶液1.0m1置同一頂空瓶中,密封。色譜條件以6%氰丙基苯基-94%二甲基聚硅氧烷(或極性相近)為固定液的毛細管柱為色譜柱;起始溫度為90℃,維持14分鐘,繼以每分鐘20℃的速率升至180℃,維持5分鐘;進樣口溫度為210℃;檢測器溫度為250℃;頂空瓶平衡溫度為70℃,平衡時間為30分鐘系統適用性要求對照品溶液色譜圖中,按丙醇、乙酸乙酯和正丁醇順序依次出峰,各色譜峰間的分離度應符合要求測定法取供試品溶液與對照品溶液分別頂空進樣,記錄色譜圖。限度按內標法以峰面積比值計算,乙酸乙酯與正丁醇的殘留量均應符合規定水分取本品,照水分測定法(通則0832第一法1)測定,含水分應為2.8%~4.0%。抽針試驗取本品1.5g,加水5m制成混懸液,用裝有號針頭的注射器抽取,應能順利通過,不得阻塞。細菌內毒素取本品,依法檢查(通則1143),每1000青霉素單位中含內毒素的量應小于0.10EU。(供注射用)無菌取本品,用適宜溶劑使分散均勻,加青霉素酶滅活后,依法檢查(通則1101),應符合規定。(供無菌分裝用)

含量測定

照高效液相色譜法(通則0512)測定。供試品溶液取本品約70mg,精密稱定,置50ml量瓶中,加流動相約30ml,超聲使溶解后,用流動相稀釋至刻度,搖勻。對照品溶液取青霉素對照品與鹽酸普魯卡因對照品適量,精密稱定,加流動相溶解并定量稀釋制成每1ml中分別約含青霉素0.8mg與普魯卡因0.54mg的溶液。系統適用性溶液取青霉素V對照品適量,加流動相溶解并稀釋制成每1ml中含青霉素ⅴ2.4mg的溶液,將此溶液與對照品溶液以1:3體積比混合。色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以緩沖液(取磷酸二氫鉀14g和40%氫氧化四丁基銨溶液6.5g溶解于約700ml水中,用1mol/L氫氧化鉀溶液調節pH值至7.0,用水稀釋至1000ml,混勻)-水乙腈(52:23:25)(用1mol/L氫氧化鉀溶液或10%稀磷酸溶液調節pH值至7.5±0.05)為流動相;檢測波長為235nm;進樣體積10l系統適用性要求系統適用性溶液色譜圖中,青霉素峰與青霉素V峰間的分離度應大于2.0。測定法精密量取供試品溶液與對照品溶液,分別注入液相色譜儀,記錄色譜圖。按外標法以峰面積計算供試品中C13H2oN2O2和C16H18N2O4S的含量。每1ng的C16H18N2O4S相當于1780青霉素單位。

類別

β-內酰胺類抗生素,青霉素類

貯藏

嚴封,在干燥處保存。

制劑

注射用普魯卡因青霉素