替考拉寧有著和萬古霉素相同的作用機理，干擾細菌細胞壁肽聚糖中新的部分的合成過程。本品通過肽聚糖亞單位中的氨基酸-D-丙氨酰-D-丙氨酸部分結分結合而起效應，這種結合將正常可被細菌細胞的延長和交叉一橋酸識別的部位“隱藏”起來。這種結合抑制兩個方面：形成細胞壁鏈的亞單位的生長或延長，將新建連接到細胞壁的最終穿越一橋步驟。因此，細胞壁的整合和牢固遭到損壞，細菌生長停止，最后死亡。
