則責任自負

2018年,PubMed 中共有194,262 篇蛋白相關的論文,其中有16,196(8.3%)篇用到了 WB。WB 的使用比例在過去30年中穩定在8%到9%左右,而更為現代和準確的蛋白質譜技術(MS),在過去十年中應用比例則穩定在4%,僅僅是WB的一半。四十年后的今天,WB依舊是應用率最高的蛋白質分析技術。但是重現性和穩定性的問題,也使Western Blot技術處在風口浪尖上。因此2014年,美國國立衛生研究院提倡提高科研重現性,呼吁研究界、科學出版商、大學、工業界和其他領域推動這一變化。率先響應的期刊有Science,Cell,Nature和JBC。那讓我們來看看期刊都有哪些具體要求:

一、不建議跑平行膠,因為平行膠和剝離膜孵育體系,操作條件的不一致,影響定量的準確性,因此最好內參和目的蛋白要在同一張印跡膜上。

二、選擇寬動態范圍的方法,確認信號強度與所上樣量之間的線性關系,例如用膠片做化學發光方法的動態范圍就很窄,不建議使用。

三、強烈推薦使用總蛋白進行歸一化,因為看家蛋白容易受處理條件影響而發生變化,影響定量的結果,使用總蛋白定量更真實地反映目標蛋白表達量的變化。

四、提交原始數據,例如:JBC,PLOS和CELL等雜志都要求要提供原始數據。

Azure Sapphire多光譜激光成像系統如何滿足期刊要求

? Sapphire是多熒光檢測系統,可多達4個激光光源,同時進行4通道熒光檢測,獲得更快的工作流程和更可靠的定量數據。
? Sapphire配合AzureRed總蛋白熒光染色劑可以做總蛋白歸一化和定量三個靶標蛋白,生成可以信賴的定量Western Blotting數據。
? Sapphire配有獨特的三種檢測器設計,最大限度地提高儀器的檢測動態范圍,保證結果的準確性。?
Sapphire提供原始數據16bit的tiff圖給到期刊,這里的tiff原始數據是指未經裁剪,像素修改,對比度調整等任何操作的圖,保證結果的真實性和可靠性。

近日,MarketsandMarkets咨詢公司發布了全球westernblotting市場的分析報告。據MarketsandMarkets預測,全球westernblotting的市場規模將從201......
一、原理一個基因表達的最終產物是產生相應的蛋白,因此檢測蛋白是測定基因表達的主要標志。 原理:WesternBlotting是將獲得的蛋白質樣品通過SDS-聚丙稀酰胺......
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科學家經常通過蛋白質的表達及修飾情況來揭示對應樣品的生理或病理狀態。WesternBlot是進行蛋白檢測的最經典技術。核酸檢測對樣品量的要求極低,因為DNA或RNA具備體外擴增的性質。而蛋白質檢測只能......
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為了追蹤Westernblot中產生的信息,研究人員大多需要使用成像系統。這些工具將蛋白分析的圖像轉換成數字文件。近年來,Westernblotting成像系統有了明顯改進。在成像工具的幫助下,數據可......
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