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  • 發布時間:2022-05-09 08:53 原文鏈接: 末端轉移酶的基本性狀

    【性狀】懸浮液,重組酶。末端轉移酶(Terminal transferase,TdT)是一種無需模板的DNA聚合酶,催化脫氧核苷酸結合到DNA分子的3'羥基端。帶有突出、凹陷或平滑末端的單雙鏈DNA分子均可作為TdT的底物。一般操作是:先在載體上打開一單個位點,把它與末端轉移酶和某一dNTP(如dATP)一起保溫以使添尾,另一待插入的外源DNA片段則用互補的用同法添dNTP(dTTP)用同法添尾。接著使上述兩種都接上互補單鏈尾的DNA片段彼此退火,使形成一雜合載體來轉化受體菌。雜合載體中的裂隙或切口可被受體菌所修復。隨酶提供10×反應緩沖液和25mMCoCl2。

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