（1）其配方與斐林試劑不一樣，其配方為：
①400mL水中加85g檸檬酸鈉和50g無水碳酸鈉；
②50mL加熱的水中加入8.5g無水硫酸銅。制成溶液；
③把溶液倒入檸檬酸鈉-碳酸鈉溶液中，邊加邊攪，如產生沉淀可濾去。
（2）其反應原理與斐林試劑略有差別。利用斐林試劑鑒定時，斐林試劑甲和斐林試劑乙直接反應生成Cu(OH)2，Cu(OH)2和可溶性還原糖反應產生磚紅色沉淀。而本尼迪特試劑中Cu(OH)2的產生卻是這樣的：檸檬酸鈉和碳酸鈉均為強堿弱酸鹽，在水中它們均可水解產生OH-，與檸檬酸鈉-碳酸鈉溶液和CuSO4溶液混合時，Cu2+和OH-結合，生成Cu(OH)2，Cu(OH)2與還原糖中的醛基反應生成磚紅色沉淀。
（3）兩種試劑的保存方式不同。斐林試劑甲和斐林試劑乙可強烈產生Cu(OH)2，Cu(OH)2很容易沉淀析出，因此斐林試劑一般為現用現配；而本尼迪特試劑的配方中，檸檬酸鈉-碳酸鈉為一對緩沖物質，產生的OH-數量有限，與CuSO4溶液混合后產生的濃度相對較低，不易析出，因此該試劑可長期保存。
（4）本尼迪特試劑與斐林試劑只適用于還原性糖（如葡萄糖）的鑒定，不用于非還原性糖（如蔗糖）的鑒定。
當然，無論用本尼迪特試劑還是斐林試劑，歸根結底都是Cu(OH)2與醛基在沸水浴加熱條件下反應而生成磚紅色的Cu2O沉淀，兩者反應現象一樣，這就是二者的相同之處。