③全菌抗原的ELISAS
a、新鮮培養的細菌用蒸餾水或PBS懸浮，并調整細菌濃度至1×108個/ml。必須指出，對于人畜共患病病原體需注意安全操作，最好是滅活處理。
b、每孔中加100ul 5%戊二醛溶液（0.1mol/L NaHCO3 95ml+25%戊二醛溶液5ml），37℃作用2小時，蒸餾水洗滌3次；加上述細菌懸液50ul/孔；37-56℃烘干；每孔加200ul封閉液4℃過夜或37℃ 2小時封閉。
c、步驟b也可采用先每孔加50ul細菌懸液，37℃-56℃烘干，然后用-20℃預冷的無水甲醇室溫作用15分鐘，蒸餾水洗滌3次；每孔加 200ul封閉液4℃過夜或37℃ 2小時封閉。
d、洗滌液洗3次；此時包被板可在-20℃或4℃保存備用。
e、以下步驟同上法。
④用全細胞抗原的ELISA
a、按常規方法培養細胞，接種病毒，收獲感染細胞和未感染細胞，進行細胞計數，用PBS制成適當濃度懸液。
b、淋巴細胞懸液的制備采用新鮮外周血加肝素抗凝后，滴加于淋巴細胞分離液之上，1500rpm離心30分鐘，吸取界面細胞洗滌二次，即為新鮮淋巴細胞懸液。該細胞懸液中若仍混有紅細胞，離心后加0.83%的氯化銨溶液，室溫10分鐘，洗滌一次即可。將該細胞懸液稀釋至適當濃度。
c、每孔加100ul上述a或b的細胞懸液，使每孔含細胞5×104個；1500r/min 15分鐘，甩去上清；室溫干燥或吹干后用丙酮-甲醇（1：1）4℃固定10分鐘；可4℃或-20℃保存備用。
d、以下步驟同上法。
⑤抗體捕捉ELISA試驗
本法用抗BALB/c小鼠Ig的多克隆抗體捕捉待檢樣品中的McAb，再依次加抗原、酶標多克隆抗體及底物顯色。該法是常用的ELISA中較理想的一種；其操作步驟如下：
a、以適當濃度的純化抗鼠Ig抗體包被酶標板，每孔加100ul，37℃ 2小時或4℃過夜。
b、洗滌、拍干后加待測的McAb樣品，37℃ 1-2小時。
c、洗滌后加適量的抗原，37℃ 1-2小時。
d、洗滌后加入酶標多克隆抗體，37℃ 1-2小時。洗滌后加底物顯色，判定結果。
⑥ABC-ELISA試驗
ABC-ELISA是在常規ELISA原理的基礎上，增加了生物素（Biotin）與親和素（Avidin）間的放大作用。親和素有4個亞單位組成，對生物素有高度的親合力。生物素很易與蛋白質共價結合。因此，結合了酶的親和素與結合有抗體的生物素發生反應即起到了多極放大作用。其操作步驟如下：
a、已知抗原的包被及加待檢McAb樣品，同間接ELISA試驗。
b、加生物素化抗鼠Ig抗體，每孔100ul，37℃ 1小時；洗滌。
c、加酶標親和素，每孔100ul，37℃ 30分鐘洗滌；加底物顯色，判定結果。