極性鍵合相色譜儀固定相是由鍵型、主體基團和極性端基構成的鍵合相。
一、組成:
1、鍵型:
鍵型是整個極性鍵合基團與硅膠母體直接相連的橋梁。如Si-O-Si-C或Si-O-Si-N。
2、主體基團:
為直鍵烴基或醚基。使硅膠表面與特定的極性基團之間保持一定距離。
3、極性端基:
為極性基團。如氨基(-NH2)、氰基(-CN)、硝基(-NO2)和二醇基。
二、類型:
氨基、氰基、芳硝基、二醇基和醚基鍵合相可用作正相色譜,主要以氫鍵力與溶質相互作用,氫鍵力大小順序為氨基>氰基>芳硝基>二醇基>醚基。
1、氨基鍵合相:
氨基鍵合相是將氨丙硅烷基鍵合在硅膠上制成的。
氨基鍵合相兼有質子接受體和給予體的雙重性能,具有強極性。
對具有較強氫鍵作用力的樣品,顯示強的分子間相互作用,k值較大。
氨基具有堿性,可在酸性水溶液中作為弱陰離子交換劑,用于分離酚、羧酸和核苷酸。
氨基用作反相固定相可與糖分子中的羥基作用,廣泛用于單糖、雙糖和多糖的分離。
氨基柱不可用于羧基化合物(如甾酮和還原糖等)的分離。
2、氰基鍵合相:
氰基鍵合相是將氰乙硅烷基鍵合在硅膠上制成的。
氰基鍵合相為質子接受體,具有中等極性,分離選擇與硅膠類似,但比硅膠的保留值低。
對酸性、堿性樣品可獲得對稱的色譜峰。
對含雙鍵的異構體或雙鍵環狀化合物具有良好的分離能力。
與氨基鍵合相比較,k值小。
3、芳硝基鍵合相:
芳硝基鍵合相具有電子轉移功能,呈弱極性,對芳香族化合物和多環芳烴有良好的分離選擇性。
4、二醇基鍵合相:
二醇基鍵合相呈弱極性,可分離有機酸和甾體,也可用作分離蛋白質的凝膠色譜的固定相。
5、醚基鍵合相:
醚基鍵合相呈弱極性,可分離形成氫鍵的化合物(如酚類和硝基化合物),也可用作分離蛋白質的凝膠色譜的固定相。
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