林金明：微流控芯片上基于核酸適配體的蛋白質檢測方法

　　2016（第四屆）先進體外診斷技術峰會于3月26日在上海勝利召開。此次會議邀請了國內外眾多體外診斷方面的專家學者，以及在體外診斷領域取得不俗業績的企業家代表。

　　會議的第二天來自清華大學化學系的林金明教授做了精彩的演講。演講主要圍繞著微流控芯片上給予核酸適配體的蛋白質檢測方法研究。

　　演講中林教授提到。微流控芯片技術可以繼承或基本繼承化學和生物等領域中所涉及的樣品制備、反應、分離、檢測等基本操作單元，以微通道形成網絡，貫穿整個系統，具有便攜、低能耗、易于制作、易于掌握等優點，易于滿足生命科學對生物樣品進行低劑量、更搞笑、高靈敏、快速分離分析的需求。利用微流控芯片夠賤一種簡單便攜的裝置用于生物標記物的檢測，有望未來戶外即時診斷和家庭醫療提供新的方法。生物標記物特別是蛋白質標志物進行快速靈敏的檢測是臨床醫療診斷、藥物治療的一個重要依據。由于微流控芯片的微型化，所需的樣品量極少（<10μL）。所以靈敏度是微流控芯片上蛋白質分析的一個重要難點。

　　免疫分析的滾環放大技術（immuno-RCA）是一種基于免疫分析、高靈敏的核算放大技術。RCA可以在室溫、恒溫下進行DNA擴增，不需要特殊的一起。通過免疫反應，目標蛋白與功能性核酸配體相結合獲得一段具有催化作用的G-四鏈體。然后，通過RCA獲得一條重復序列的G-四鏈體。G四鏈體能與血紅素自組裝，在ABTS和過氧化氫作用下，產生不同的顏色，可用肉眼直接觀察。更為重要的是，根據現行動力學模型進行的RCA反應能夠直接進行半定量分析不需要過多的標準物。因此，RCA是一種適合在芯片上進行信號擴增的新技術，能及大地提高分析的敏感性和特異性，用于微量的生物大分子和生物標志的檢測與研究，是未來生物芯片發展和普及使用不可缺少的檢測手段。

　　林教授的研究以檢測凝血酶為例，將微流控芯片技術和功能性核酸適配體的免疫分析技術相結合，發展了一種快速簡單、高靈敏度、易于攜帶的裝置用于生物標志物的分析。此方法在微流控芯片上平行的排列了多個微通道，并在通道上修飾具有特異性的核酸適配體目標蛋白質進行的高通量、特異性捕獲和分析，降低了基質干擾。利用滾環擴增和G-四鏈體DNAzyme的作用，實現了信號的放大，提高分析的靈敏度，降低檢測限。同時，可以通過顏色的變化，可以通孤傲肉眼進行初步的判斷。