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  • 發布時間:2020-08-17 19:46 原文鏈接: 染料攝取法測定細胞生存力實驗

    實驗方法原理 細胞懸液用碘化丙啶和二乙酰熒光素的混合液染色,用熒光顯微鏡或流式細胞儀檢測。

    實驗步驟

    材料


    無菌 


    單細胞懸液

    雙醋酸熒光素,10ug/ml,溶于 HBSS

    碘化丙啶,500ug/ml


    非滅菌


    熒光顯微鏡

    濾光片

    熒光素:激發 450/590 nm ,發射 LP 515 nm

    碘化丙啶:激發 488nm ,發射 615 nm


    操作步驟


    1. 細胞懸液的制備與染料排斥法相同(見方案 22.1),但是生長液中不含酚紅。

    2. 以 1 : 10 的比例加入熒光素染料混合液,二乙酰熒光素的終濃度為 l ug/ml,碘化丙啶的終濃度為 50ug/ml。 :

    3. 將細胞置于 37°C , 溫育 10 min。

    4. 將一滴細胞滴在載玻片上,蓋上蓋玻片,用熒光顯微鏡觀察。


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