1、化驗取材
血液。
2、柯薩奇病毒抗體的測定原理
特異性的抗病毒免疫血清(中和抗體)和病毒結合后,使病毒不能吸附于敏感細胞,或結合后抑制其吸附和脫殼,因此,病毒就失去其感染的能力。這一反應不但表現為質的方面,而且還表現在量的方面。即中和一定量病毒的感染力必須有一定效價的免疫血清。
中和試驗是以測定病毒的感染力為基礎,所以試驗必須在動物、或組織培養細胞等活體內進行,必須選用對病毒敏感的細胞,動物或雞胚為材料。中和抗體滴定的判定是以比較病毒受免疫血清中和后的殘存感染力為依據,因此對照實驗十分重要。
3、試劑
試管,吸管,病毒稀釋液,培育箱,Hep-2或RD或其它敏感細胞,已知型別和滴度的柯薩奇病毒標準毒株。
4、操作方法
(1)對待檢血清56℃滅活30min后作連續倍比稀釋。
(2)每個稀釋度的血清與等量標準毒株(0.1ml含有100TCID50)混合,置37℃ 2h。
(3)將血清一病毒混合物接種細胞,每個稀釋度接種四管,每管0.2ml。同時設病毒、細胞對照。
(4)37℃培養,隔日觀察,7天判定結果。
中和試驗也可以使用微量法。另外除了組織培養中和試驗外,也可以使用動物中和試驗。
(5)微量法參考脊灰病毒的進行。