答:測定方法如下:
(1)方法原理
在堿性條件下用氫氧化銅沉淀蛋白質,然后按照開氏法測定氮。此法的優點是沉淀較快,缺點是有些氨基酸可與銅生成沉淀,使測定結果偏高。
(2)儀器設備
定氮儀、電爐、分析天平等。
(3)試劑配制
①10%硫酸銅溶液:稱取50克硫酸銅(CuSO4·5H2O)溶于水,定容至500毫升。
②2.5%氫氧化鈉(NaOH)溶液:稱取2.5克氫氧化鈉溶于100毫升水中。
③0.02摩爾/升硫酸溶液:先配制0.10摩爾/升 H2SO4溶液,標定后稀釋5倍。
④2%硼酸溶液、混合指示劑、40%氫氧化鈉(NaOH)溶液:同開氏法全氮測定。
⑤鐵氰化鉀溶液:1克鐵氰化鉀溶于100毫升水中。
(4)測定方法
①稱取磨碎的葉子或枝條樣品1.0000克左右放入250毫升燒杯中,加熱水50毫升,加熱至沸騰。趁熱加入10%硫酸銅和5%氫氧化鈉溶液各20毫升,充分攪拌,放置1小時,抽氣過慮,沉淀用熱水洗滌數次,最后用熱水洗至無銅離子(用鐵氰化鉀溶液試濾液),使沉淀干燥。
②將沉淀連同濾紙一并移入開氏瓶中,測定全氮含量。每批樣品測定的同時,用0.1克蔗糖(分析純)代替試樣做空白試驗。
(5)結果計算
蛋白態氮的計算同全氮量的測定。