核糖核酸酶（胰腺）的測定實驗

RNaseⅠ

分解 RNA 形成 3'-磷酸單核苷酸和 3'-磷酸多核苷酸，以 Cp 或 Up 結尾形成一個 2'，3'-環狀磷酸中間體。

酶樣品

乙酸緩沖液 乙酸鈾酰-高氯溶液 RNA（酵母）溶液 核酸核酸酶

分光光度計

實驗所需「試劑」具體見「其他」

0.6 ml 1％ RNA 溶液

0.1 ml 酶（向空白對照中加入約 1.0 ml 0.1 mol/L 乙酸緩沖液，pH 5.0）

37℃ 培養 4 min，停止反應要加入 0.3 ml 乙酸鈾酰-高氯溶液冰上

防止 5 min，離心 5 min，然后稀釋 0.1 ml 上清液與 0.9 ml H₂O

測量 260 nm 處增加的吸收值。

計算

1 個單位被定義為：在上述的條件下，37℃、pH 5.0 時，引起吸收值變化 1.0 的酶量。

試劑：

0.1 mol/L 乙酸緩沖液，pH 5.0（5.7 ml 乙酸，100％，Mr＝60，溶于 800 ml 水中，用 1 mol/L NaOH 調節至 pH 4.0，補充至 1 L）

乙酸鈾酰-高氯溶液（0.75％ 乙酸鈾酰溶于 25％ 高氯溶液）

RNA（酵母）溶液（50 mg/10 ml 溶于 0.1 mol/L 乙酸鈉緩沖液 pH 5.0）核酸核酸酶（1 mg/ml，使用前在 0.1 mol/L 乙酸鈉緩沖液 pH 5.0 中稀釋 100 倍）