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  • 發布時間:2019-04-05 22:32 原文鏈接: 核酸染色實驗——DNA

    核酸是細胞內的一種大分子化合物,核酸不僅存在于細胞核內,也存在于細胞質中,動物、植物和微生物等都含有核酸。核酸可分為核糖核酸(RNA)和脫氧核糖核酸(DNA)。

    經過染料和化學試劑,能夠清楚地顯示 DNA 和核仁組成區嗜銀蛋白(AgNOR)物質。

    實驗方法原理在一般情況下,通過鹽酸水解后使 DNA 殘基分解堿基,然后從碳鍵處打斷糖苷鍵而游離出醛基,再與無色復紅液(Schiff)進行反應,形成紫紅色的復合物(DNA)。常用 Feuhgen-Rossenbeck 染色法(孚爾根染色法)。
    實驗材料

    石蠟組織切片

    試劑、試劑盒

    Schiff 試劑染色液濃鹽酸蒸餾水二甲苯無水乙醇中性樹膠

    儀器、耗材

    滴管

    實驗步驟


    Schiff 試劑染色液(見糖原部分)。


    5mol/L 鹽酸液:濃鹽酸(相對密度 1.19)42 ml,蒸餾水加至 100 ml。


    1. 石蠟組織切片,常規脫蠟至水。


    2. 蒸餾水洗 2 min,5mol/L 鹽酸液中水解 30 min。


    3. 蒸餾水洗 3 次,浸入 Schiff 染色液中 30 min。


    4. 直接浸入自來水中 5 min。


    5. 根據需要進行對比染色。


    6. 無水乙醇脫水,二甲苯透明和中性樹膠封固。

    展開 
    注意事項


    1. Schiff 試劑每次使用時,要注意吸管淸潔,試劑用后應及時存放冰箱。


    2. 對比染色劑可選用亮綠或苯胺藍,根據需要進行淡染色。

    其他

    結果:DNA 呈紫紅色,其他是對比染色。


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