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  • 發布時間:2019-05-20 18:38 原文鏈接: 核酸的銀染方法

    核酸硝酸銀染色:參考《鋅對缺血再灌注大鼠肝臟金屬硫蛋白一1基因表達的影響》營養學報2000年第22卷第4期294-297

    取PCR產物進行聚丙烯酰胺凝膠(PAGE)電泳,所得凝膠進行硝酸銀染色.
    程序如下:(1)于10%乙醇+0.5% 冰醋酸溶液中固定6 min;(2)于10%乙醇+0.5% 冰醋酸溶液中再固定6 min;(3)于0.2 %AgNO3溶液中浸泡10~12 min;(4)用去離子水充分漂洗3~5次;(5)于1.5 %NaOH + 0.4 %甲醛溶液中適度顯色;加入0.75% Na2CO3終止染色 

     

    參考《 核酸電泳銀染技術及干膠制備的改良》臨床與實驗病理學雜志1999 Vol.15 No.5 P.401
    核酸電泳銀染色技術,是近年發展起來的一種敏感性高、操作簡便、無毒污染、快速省時的新方法。
    銀染色 
    (1)固定:先用10%乙醇固定5 min;然后用1%硝酸固定10~15 min(去離子水洗 2次)。
    (2)染色:0.2%硝酸銀染色5 min(去離子水洗2次)。
    (3)顯色:3%無水Na2CO3顯色(18 gNa2CO3+600 ml水+60 μl甲醛+60 μl Na2SO4),顯色過程中更換顯色液2~3次,直至DNA Marker或陽性模板條帶清晰為止(去離子水洗2次)。
    (4)中止顯色:棄顯色液,水洗,加固定液(1∶3的1%硝酸+10%乙醇)。 


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