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  • 發布時間:2019-11-12 17:41 原文鏈接: 根際pH的顯色測定實驗

    實驗方法原理


    本方法是利用pH指示劑在不同酸堿度條件下變色的特點,測試根際pH的變化。將pH指示劑加入到具有一定營養條件下的瓊脂溶膠中,組成瓊脂-指示劑混合液。植物根系可直接利用其作為介質生長。由于根系的吸收和溢泌等生理活動,使根際pH不同于原介質,由此產生不同的顯色反應。對照標準pH變色范圍,可以確定根際pH上升或下降的幅度及數值。
    實驗材料

    小麥幼苗                                                          

    試劑、試劑盒

    NH4+的培養液                                                                  

    溴甲酚紫                                                          

    儀器、耗材

    培養皿

    扭力天平                                                                  

    電爐                                                                  

    pH計 量筒                                                                  

    燒杯                                                                  

    移液管                                                                 

    玻棒                                                                  

    鑷子                                                                 

    洗耳球                                                                  

    吸水濾紙                                                                 

    塑料薄膜                                                                 

    瓊脂                                                          

    實驗步驟一、材料和設備

    小麥幼苗,直徑10 cm 的培養皿,扭力天平,電爐,pH計,50 ml 量筒,100  ml 燒杯,0.5  ml 移液管,玻棒,鑷子,洗耳球,吸水濾紙,10×10cm 塑料薄膜,瓊脂

    50pp M 含NH4+的培養液:(1000  ml H2O+183 M g(NH4)2SO4+136 M gCaSO4)

    0.6%溴甲酚紫:0.6克溴甲酚紫用少量95%酒精溶解后,用蒸餾水定溶至100  ml

    0.01N NaOH,0.01N HCl

    二、實驗步驟

    1.顯色基質的準備:取50  ml 含50pp M  NH4+的培養液,加入0.5克瓊脂和0.5  ml  0.6%的溴甲酚紫指示液,在電爐上攪拌加熱至沸騰。然后冷至40℃左右時,用稀NaOH或稀HCl調pH至6.0(暗紅色)。

    2.顯色:將瓊脂-指示劑混合液倒入培養皿中,使之成為均一的薄層,冷卻凝固后備用。取預先培養7-10天的小麥幼苗(根長10cm 左右)1株,用蒸餾水沖洗根系,于塑料薄膜(10×10cm )上展平,并用吸水紙吸干薄膜和根表的水分,反轉貼于已凝固的瓊脂-指示劑混合液上,輕壓驅除氣泡并使根系嵌入凝膠中。室溫條件下1小時左右,pH指示劑即顯顏色變化。

    3.觀察現象并解釋結果:pH指示劑不同顏色指示出不同根際部位的pH值。觀察根系周圍瓊脂-指示劑混合液的顏色變化,確定根系pH是上升還是下降,說明根系pH值變化的原因。本實際可用標準瓊脂-指示劑作對照,確定各根區的pH值,還可用微電極進行精確測定。
    注意事項1.溴甲酚紫顯色范圍為pH5.2-6.8(黃-紫),適用于微酸性條件下使用;

    甲酚紅變色范圍為pH7.2-8.8(黃-紅),適用于堿性條件下使用。

    2.塑料薄膜和根表的水分必須吸干,否則影響顯色結果。


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