（四） 樣本采集及運送
1、樣本采集時間
若對同一病人作多次測定最好每次在同一時間收集標本，便于比較，以減少人體內各分析物晝夜變化的影響。晝夜變化有內在因素（主要取決于人是在活動還是在睡眠狀態），以及外來因素（如飲食、體育活動或其他和某一特定時間有關的活動）。
血樣標本采集理想的時間是早晨7：00到8：00，尤其在目的為監測時，最后一次食物和液體攝入應在前一天下午6：00到7：00；對于某些試驗要有特殊的說明。如做糖耐量試驗或餐后兩小時血糖的病人，一定要詳細告訴病人何時抽血等事宜。
2、采樣系統的使用
長期以來，我國臨床生化采血沒有統一的器材，有的使用經反復洗滌的玻璃試管，有的使用一次性塑料試管，使用中存在不少問題，如試管洗滌不干凈造成溶血或殘存物質對測定的干擾；軟質塑料試管采血，血液自然凝固析出血清時間長，容易造成血清中被檢成分的改變，如葡萄糖酵解、酶活性降低、細胞中鉀離子外溢等。
血樣標本最好采用真空采血系統，這是保證質量的重要措施之一。目前推廣使用真空采血系統可有效避免用錯抗凝劑，保證了血與抗凝劑比例，解決了交叉污染，防止標本溶血，加分離膠還可加速血清分離等有效措施。真空采血系統采集血液后，應輕輕顛倒混勻5~10次，以確保抗凝劑和促凝劑（分離膠）發揮作用。
3、正確使用抗凝劑
目前常用的抗凝劑有肝素、EDTA鹽和枸櫞酸鹽，實驗室應正確使用相應的抗凝劑，且標本采集時應注意血液與抗凝劑的比例。
（1）肝素：通常用肝素鋰，濃度為14.3IU/mL血，用量范圍為12~30IU/mL，常用于血粘度測定，血氣酸堿分析及酶學檢查。
（2）EDTA鹽：通常用EDTAK2，濃度為1.5~2.0mg/dl，常用于全血細胞計數及血粘度測定。
（3）枸櫞酸鹽：通常用枸櫞酸鈉，濃度為109mmol/L或3.8%，主要用于凝血試驗（抗凝劑與血液1：9混合，過高或過低，均可影響PT、APTT的結果），RBC沉降率試驗（抗凝劑與血液1：4混勻）。
4、標本的運送
血液標本采集后應盡快從采血現場運送至實驗室，盡快檢驗，減少標本的放置時間，因為細胞的代謝、光學、化學反應、微生物分解及其蛋白質酶的裂解都將對生化檢測結果產生影響。
目前，多數醫院住院病人的血液標本都是由夜班護士完成采血，由于工作的特殊性，任務重、時間緊，大多數護士采集時間在早晨5~6點，而檢驗時間在上午9~10點開始，這樣無疑就耽擱了四五個小時。血標本的化學成分在放置后可有某些變化。
如標本放置時間過久，可由于糖酵解而導致血糖下降；有些物質可以通過紅細胞膜或由于紅細胞的破壞而進入血漿，如紅細胞內鉀、乳酸脫氫酶、轉氨酶、堿性磷酸酶等；血漿中無機磷可由紅細胞內有機磷酸酯水解而增加，因此測無機磷時應及分離血清；有些不穩定的酶放置后易失活，如酸性磷酸酶等。因此，常規生化標本采集后應由專人及時收取或送檢，急診標本隨留隨送。采集后的標本放置時間越短，結果的變異就越小。
如標本確實不能及時檢測，必須貯存時，應：
（1）防止蒸發：血標本應貯存在密閉的容器中，即使貯存在冰箱內，蒸發的危險性 依然存在。
（2）血標本貯存的溫度越低，血樣保存時間越長。但是特殊指標如血液形態學指標除外。
（3）血樣保存應豎立放置以加快凝血。
（4）避免晃動血樣，以免產生溶血。
（5）貯存時注意避光，盡量隔絕空氣。
（6）血樣深冷凍再溶解后，應重復混勻數次，以防檢測物質分布不均。
全血采取后應盡快自然地使血清（漿）從與血細胞接觸的全血中分離出來。一般應于采血后2小時內分離出血清或血漿，以防止血細胞內外多種成分發生變化。血清標本離心前一般要先自行凝集，所等的時間包括凝血和血塊收縮時間，通常這個過程大致要30分鐘，加促凝劑時凝集可加快，切勿用竹簽剝離凝血塊，因人為剝離會誘導溶血。
血漿標本的最大優點在于及時檢測，而不需要等到血液凝固后檢測，而且可以避免血液凝固引起的輕度溶血所導致的錯誤，血漿標本還可避免血凝過程中RBC釋放鉀離子和酶，使得鉀離子和部分酶增高，另一方面血清標本由于缺乏纖維蛋白原，而使血清總蛋白較低。
（五）實驗室標本的接收與處理
1、嚴格執行病人、化驗單及標本收集器皿的核對制度，保證無差錯。
2、對檢驗申請單要認真審核。包括檢驗項目、診斷以及標本采集時間及采集者的簽名等，24h尿液收集要有真實時間記錄及總量記錄。
3、收集符合要求的標本：簽收人員應逐一檢查標本的質量，避免血少或嚴重污染等，對不合格、但可以接受的樣本，簽收人員要記錄標本的缺陷，對于諸如空管等不可接納的樣本，簽收人員應拒絕接受，同時注明拒收原因，并通知臨床重新采集標本。
4、建立標本保管制度：隨著標本放置時間的延長，有些成分的變化較大，對不能及時檢驗的標本，經正確處理后放冰箱（或冰凍）保存；對發出報告的常規標本一般保留1-2天，以備復查。
5、血清或（血漿）標本的處理方法
檢驗科收到臨床標本后，應盡快低速離心分離血清或血漿進行測定。45℃水浴10分鐘，再3000r/min離心5分鐘，即可使LDH、K等顯著升高。對血液標本外觀觀察是判斷標本質量的最直觀的方法，外觀異常有溶血、黃疸、脂血等情形，是引起測定誤差最常見的因素。
（1）標本的離心
離心分離血清應選擇相對離心力（RCF）為1000g~1200g，離心時間為5~10分鐘。增加相對離心力或增加離心時間，都易引起溶血。
（2）溶血標本的處理
溶血可導致RBC內多種成分的釋出，引起對測定方法的干擾，Hb≥0.2g/L，肉眼可見溶血。
①間接干擾：Hb的釋出，可引起間接的干擾，因Hb在波長為431nm和555nm處有光吸收，若被測物選用與之相近波長作比色分析時，可導致假性增高。處理方法：輕度溶血，同時作血清空白；嚴重溶血，重留樣本。
②直接干擾：RBC內含量高的血液化學成分溶血后，這些化學成分在血清中濃度就會增高，避免用溶血標本測定在RBC內含物高的化學成分。如鉀、ALP、AST、Bil、CK、LD、ACP等
（3）乳糜標本的處理
高脂血癥的病人往往可導致乳糜血，為了不影響檢測，應對乳糜血進行澄清。具體方法如下：血清和（或）血漿與氟利昂以1：1在玻璃試管中混合。氟利昂在血漿和（或）血清下，180℃顛倒試管3min，使充分混合。然后3000g離心6min。上清液為澄清的血清，中層含沉淀的脂蛋白，下層為多余的氟利昂，澄清過程可重復多次而不影響酶的活性和底物。
（4）膽紅素（黃疸）標本的處理
膽紅素的顏色對反應結果為黃色和紅色化合物的比色分析有正向干擾，可用樣品空白或動力學和雙試劑消除。另外，膽紅素不穩定，在堿性環境或強光線照射下，轉變為膽綠素、膽褐素而褪色，如用堿性苦味酸法測定肌酐，黃疸標本常常會出現負數。另外膽紅素還有還原性，對Trinder反應有負干擾，如氧化酶法測定葡萄糖、膽固醇、甘油三脂、尿酸等，可通過進行干擾試驗消除恒定誤差。
6、標本保存
因分析不能立即進行或分析后需要重新檢測，樣本需要保存。如果是后一種目的，標本可根據下列原則保存而不會產生明顯影響。
1、短期保存
（1）全血細胞計數（不包括分類）所用EDTA抗凝血可在室溫下保存24h。分類計數、涂片應在標本收集后5h內完成。如果用血細胞分析儀對血細胞分類，根據所用的不同的分析系統，標本保存都不應超過8h。
（2）用于APTT與PT的血小板枸櫞酸抗凝血漿，可在室溫下保存8h。應在3h內測定凝血因子活力，而且血漿必須始終在4~8℃保存。
（3）檢測酶或底物的血清或肝素抗凝血漿可在4~8℃保存一周，但酶對LD和ACP例外，因LD活力對冷不穩定，ACP只在酸性條件穩定，底物TG例外，因為內源性脂肪酶可分解TG為甘油。
（4）血漿蛋白：包括免疫球蛋白和特異性抗體，4~8℃可保存一周。如果不超過25℃，標本普通的郵寄是可以的。
2、長期保存
長期保存，要求保存溫度低于-20℃，溶解必須緩慢，在4~8℃過夜或在水浴中不斷攪動。通常在溶解中形成濃度梯度，所以分析前必須充分混勻，必須注意試管底部的沉積物，它們可能由冷球蛋白、異型蛋白或冷沉淀纖維蛋白原引起，如果必要，這些沉淀通過加熱重新溶解。