植物體內可溶性糖含量的測定(蒽酮法)

糠醛或羥甲基糠醛進一步與蒽酮試劑縮合產生藍綠色物質，其在可見光區620nm波長處有最大吸收，且其光吸收值在一定范圍內與糖的含量成正比關系。

此法可用于單糖、寡糖和多糖的含量測定，并具有靈敏度高，簡便快捷，適用于微量樣品的測定等優點。

植物材料                                                          

標準葡萄糖                                                                  蒽酮試劑                                                                  濃硫酸                                                          

分光光度計                                                                  具塞刻度試管                                                                  恒溫水箱                                                                  漏斗                                                                  容量瓶                                                                  試管                                                                  試管架                                                                  研缽                                                          

1.葡萄糖標準曲線的制作

取6支20ml具寒試管，編號，按下表數據配制一系列不同濃度的標準葡萄糖溶液。

在每管中均加入0.5ml蒽酮試劑，再緩慢地加入5ml濃H2SO4，搖勻后，打開試管塞，置沸水浴中煮沸10分鐘，取出冷卻至室溫，在620nm波長下比色，測各管溶液的光密度值（OD），以標準葡萄糖含量為橫坐標，光密度值為縱坐標，作出標準曲線。

2.樣品中可溶性糖的提取

稱取1克白菜葉，剪碎，置于研缽中，加入少量蒸餾水，研磨成勻漿，然后轉入20ml刻度試管中，用10ml蒸餾水分次洗滌研缽，洗液一并轉入刻度試管中。置沸水浴中加蓋煮沸10分鐘，冷卻后過濾，濾液收集于100ml容量瓶中，用蒸餾水定容至刻度，搖勻備用。

3.糖含量測定

用移液管吸收1ml提取液于20ml具塞刻度試管中，加1ml水和0.5ml蒽酮試劑。再緩慢加入5ml濃H2SO4（注意：濃硫酸遇水會產生大量的熱！），蓋上試管塞后，輕輕搖勻，再置沸水浴中10分鐘（比色空白用2ml蒸餾水與0.5ml蒽酮試劑混合，并一同于沸水浴保溫10分鐘）。冷卻至室溫后，在波長620nm下比色，記錄光密度值。查標準曲線上得知對應的葡萄糖含量（μg）。

五、結果計算

1、加濃H2SO4時應緩慢加入，以免產生大量熱量而爆沸，灼傷皮膚，如出現上述情況，應迅速用自來水沖洗。

2、水浴加熱時應打開試管塞。