一、儀器設備
分光光度計，分析天平，恒溫水浴 ，研缽 ，容量瓶，具塞試管，移液管，漏斗，濾紙
具塞試管：25毫升9支
移液管：2毫升4支，5毫升2支
二、試劑
1．酸性茚三酮：稱取2.5克茚三酮，加入60毫升冰醋酸和40毫升6 M 磷酸，于70℃下加熱溶解。冷卻后貯于棕色試劑瓶中備用。4℃下2～3日內有效。
2．脯氨酸標準溶液：稱取0.0250克脯氨酸，溶解在250毫升蒸餾水中，其濃度為100微克/毫升。再取此液10毫升，用蒸餾水稀釋至100毫升，即為10微克/毫升之脯氨酸標準液。
3．冰醋酸
4．甲苯
若用磺基水楊酸提取，需要配制3%的磺基水楊酸溶液。（若用酒精提取，需要80%的酒精，活性炭，人造沸石）。
三、材料
生長在灌水及干旱條件下的小麥或其它作物。
四、方法步驟
1．制作標準曲線：取7支25毫升具塞試管，編號。分別向各管準確加入 脯氨酸標準液（每毫升含脯氨酸10微克）0，0.2，0.4，0.8，1.2，1.6，2.0毫升，再用蒸餾水將體積補至2毫升，搖勻，便配成了分別含0，2，4，8，12，16，20微克脯氨酸的標準系列。再向各管加入冰醋酸和酸性茚三酮各2毫升。搖勻后，在沸水浴中加熱顯色30分鐘，取出后冷卻至室溫，向各管加入5毫升甲苯，充分搖動，以萃取紅色產物。萃取完后（避光靜置4小時以上），待完全分層后，用吸管吸取甲苯層，用分光光度計在520n M 波長下測定消光值，以脯氨酸含量為橫座標，消光值為縱座標，繪制標準曲線。
2．游離脯氨酸提取：植物體內的游離脯氨酸可以用3%的磺基水楊酸提取。磺基水楊酸提取：稱取新鮮和萎蔫小麥葉片各0.5克，將稱好的樣品放入具塞試管中，加入5毫升3%的磺基水楊酸溶液，將試管浸入沸水浴中提取15分鐘，過濾，濾液待測。
3．測定：吸取濾液2毫升于試管內，與標準濃度的脯氨酸系列溶液同法顯色測定。
4．計算：測定結果按下式計算
式中：C＝從標準曲線上查得脯氨酸微克數；
V＝提取液總體積（毫升）；
a＝測定時取用提取液毫升數；
W＝樣品干重（克），106＝將克換算為微克。
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