活體電穿孔法基因導入和表達效率較高,它的特點主要在以下幾個方面:
1、首先,靶器官的選擇面廣
理論上任何組織和器官都可以作為活體電穿孔的靶器官。
在用于基因治療方面，要考慮到靶器官組織生理特性。如果所選擇的局部組織細胞不能把所轉移基因的表達產物分泌到外周血液循環中,則在某種意義上說已失去了基因導入的價值,這在基因治療中是關鍵性的問題。當使用組織特異性表達載體時,研究人員應根據所構建的表達載體來選擇基因轉移和表達的靶器官組織。例如魚精蛋白21 啟動子可指導外源基因在精母細胞中特異性表達,以小鼠的睪丸作為靶器官將含有魚精蛋白21啟動子的表達載體導入,獲得外源基因的表達量遠遠高于該基因在肝臟和骨骼肌中的表達。
2、其次,對導入的外源基因片段的大小沒有限制
從幾KB 或十幾KB 的表達載體, 到100～200KB 的YAC、BAC 基因組,都有成功導入并獲得表達的報道。
此外活體電穿孔法操作簡單快速,電穿孔的時間只有幾秒鐘,而且DNA片段不需要特殊的純化操作。
但電穿孔法也存在一些的缺點:首先,外源基因表達持續的時間很短,雖然外源基因導入后最快可在215 小時有表達,但大多1～2 月后表達量降至很低。外源基因表達的時間主要由于所構建的表達載體和基因導入的靶細胞組織器官不同而存在巨大差異。
由于應用不同的表達載體,Muramatsu 在小鼠肝臟進行電穿孔7天后則檢測不到外源基因的表達,而Heller 21 天后還可以檢測到外源基因的表達。如果選擇代謝和酶活動旺盛的組織器官如肝臟,則表達持續時間會較短,表達時間在1 個月以內,但以骨骼肌為靶組織,表達可持續15個月。