琥珀酸脫氫酶存在于所有有氧呼吸細胞,和線粒體膜牢固結合,是三羧酸循環中唯一與內膜結合的酶,是脫氫酶中最重要的酶。迄今為止,已從多種原核和真核組織中分離純化出這種酶,為該酶的酶學研究奠定了基礎。作為膜內酶,琥珀酸脫氫酶與具有脂雙層結構的線粒體膜結合得比較緊密,很難溶解下來,而且其一旦離開膜后,暴露在空氣中會很快失活,因此其提純難度很大。1950年我國著名生物化學家王應睞、鄒承魯、汪靜英等開展對膜蛋白琥珀酸脫氫酶的研究,經過反復實驗最后以正丁醇抽提法成功地把琥珀酸脫氫酶從鼠肝組織線粒體膜上溶解下來,得到了高純度的水溶性琥珀酸脫氫酶,其活力比同期國外報道者高出1倍以上,從而奠定了我國在琥珀酸脫氫酶研究領域的領先地位。其后,Davis等（1971、1977）使用NaClO4從牛心線粒體溶解下此酶；TsukahoHattori和TadashiAsahi（1982）選用離子型去垢劑脫氧膽酸鈉從番薯根線粒體提取SDH；Suraveratum等（2000）對惡性瘧原蟲的琥珀酸脫氫酶進行了純化；夏玉鳳等（2000）以玉米黃化苗為生物材料,通過差速離心獲得線粒體,使用超聲波將其破碎,用2%TritonX-100溶膜,超速離心,硫酸銨沉淀,DEAE-C32層析純化琥珀酸脫氫酶；辛明秀等（2004）用常規酶學方法從嗜冷酵母（Y18）中分離純化出有催化活性的琥珀酸脫氫酶。
琥珀酸脫氫酶是直接連在電子傳遞鏈上的,氫受體是FAD而不是NAD+,它使琥珀酸氧化為延胡索酸過程中所產生的FADH2與酶結合,將來自FADH2的兩個電子直接傳遞給酶的Fe3+。現有研究表明,琥珀酸脫氫酶由α、β兩個亞基組成,α亞基相對分子質量為70.0×103,含有FAD和兩個鐵硫簇；β亞基相對分子質量為27.0×103,含有一個鐵硫簇。