概述紅霉素的有關物質檢查

　　1、堿度

　　取紅霉素0.1g，加水150mL，振搖，依法測定（通則0631），pH值應為8.0～10.5。

　　2、有關物質

　　照高效液相色譜法（通則0512）測定。

　　pH8.0磷酸鹽溶液：取磷酸氫二鉀11.5g，加水900mL使溶解，用10%磷酸溶液調節pH值至8.0，用水稀釋成1000mL。

　　供試品溶液：取本品約40mg，置10mL量瓶中，加甲醇4mL使溶解，用pH8.0磷酸鹽溶液稀釋至刻度，搖勻。

　　對照溶液：精密量取供試品溶液1mL，置100mL量瓶中，用pH8.0磷酸鹽溶液-甲醇（3:2）稀釋至刻度，搖勻。

　　系統適用性溶液（1）：取紅霉素標準品約40mg，置10mL量瓶中，加甲醇4mL使溶解，用pH8.0磷酸鹽溶液稀釋至刻度，搖勻。

　　系統適用性溶液（2）：取紅霉素系統適用性對照品40mg，置10mL量瓶中，加甲醇4mL使溶解，用pH8.0磷酸鹽溶液稀釋至刻度，搖勻。

　　靈敏度溶液：精密量取對照溶液適量，用pH8.0磷酸鹽溶液-甲醇（3:2）定量稀釋制成每1mL中約含4μg的溶液。

　　色譜條件：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑（XTerraRP C18柱，4.6mm×250mm，3.5μm或效能相當的色譜柱），以乙腈-0.2mol/L磷酸氫二鉀溶液（用磷酸調節pH值至7.0）-水（35:5:60）為流動相A，以乙腈-0.2mol/L磷酸氫二鉀溶液（用磷酸調節pH值至7.0）-水（50:5:45）為流動相B，先以流動相A等度洗脫，待紅霉素B洗脫完畢后立即按下表進行線性梯度洗脫，流速為每分鐘1.0mL，柱溫為65℃，檢測波長為210nm，進樣體積100μL。

　　系統適用性要求：系統適用性溶液（1）色譜圖中，紅霉素A峰的拖尾因子應不大于2.0。系統適用性溶液（2）色譜圖，應與紅霉素系統適用性對照品的標準圖譜一致，紅霉素A峰的保留時間約為23分鐘，雜質A、雜質B、雜質C、雜質D、雜質E與雜質F的相對保留時間分別約為0.4、0.5、0.9、1.6、2.3和1.8，紅霉素B與紅霉素C的相對保留時間分別約為1.7和0.55，雜質B峰與紅霉素C峰、紅霉素B峰與雜質F峰間的分離度應不小于1.2，雜質C峰與紅霉素A峰間的分離度應符合要求。靈敏度溶液色譜圖中，主成分色譜峰高的信噪比應大于10。

　　測定法：精密量取供試品溶液與對照溶液，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。

　　限度：供試品溶液色譜圖中如有雜質峰，雜質C峰面積不得大于對照溶液主峰面積的3倍（3.0%），雜質E與雜質F校正后的峰面積（乘以校正因子0.08）均不得大于對照溶液主峰面積的2倍（2.0%），雜質D校正后的峰面積（乘以校正因子2）不得大于對照溶液主峰面積的2倍（2.0%），雜質A、雜質B及其他單個雜質的峰面積均不得大于對照溶液主峰面積的2倍（2.0%），各雜質校正后的峰面積之和不得大于對照溶液主峰面積的7倍（7.0%），小于靈敏度溶液主峰面積的峰忽略不計。