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  • 發布時間:2022-04-06 19:01 原文鏈接: 概述DNA測序技術的操作

      成功地使用銀染測序系統需要對提供的操作方法進行仔細考慮。銀染不如放射性檢測法靈敏,而需要更多的模板量,此外,也不可能通過延長X-光膠片曝光時間的方法增加信號強度。因此,請使用推薦的DNA模板量, 每次均使用所提供的對照檢查系統的可靠性,并且注意如下幾點:

      (1) DNA的濃度和純度必須經過瓊脂糖凝膠電泳或熒光法測定, 樣品應與已知量DNA一起電泳。

      (2) 分光光度法對于很多DNA提取物包括質粒小量制備來說,并不能給出一個可信的DNA濃度估計,混雜的染色體DNA、蛋白、RNA、有機物及無機化合物均可能有260 nm光吸收。因此,分光光度法常常錯誤地高估DNA濃度。(3) DNA制備過程中用核糖核酸酶處理所產生核糖核苷酸,雖然它們在電泳后DNA樣品的前面,并不能觀察到,但它們仍會有260nm光吸收。

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