(1)定義:正(反)相色譜法是流動相極性小(大)于固定相極性的液相色譜法。(2)固定相:正相色譜法使用極性固定相,如氰基、氨基鍵合相;反相色譜法使用非極性固定相,如C18、C8、苯基、二醇基鍵合相,或使用極性大的流動相,使用氰基、氨基鍵合相。(3)流動相:正相色譜法的流動相為烷基加適量極性調節劑;反相色譜法的流動相一般以水作為基礎溶劑,加入甲醇、乙腈等有機溶劑調節極性。水相可以含有緩沖鹽,可以加入酸或堿調節pH值。(4)應用范圍:正相色譜法一般用來分離極性較大的化合物;而反相色譜法用來分離極性小或中等極性的化合物。(5)流動相極性對洗脫順序的影響:在正相色譜法中,增加流動相的極性,如在正已烷-乙醇體系中,增加乙醇的比例,組分的tR減小、k減小;在反相色譜法中增加流動相的極性,如在甲醇-水體系中,增加水的比例,則組分的tR增大、k增大。(6)組分的極性與洗脫順序的關系:在正相色譜法中,極性大的組分tR大、k大;在反相色譜法中則正好相反,極性大的組分tR小、k小。