1.方法
（1）麝香草酚酞比色法：該方法目前已少用。
（2）連續監測法：α-磷酸萘胺在酸性條件下被ACP水解為α-萘酚和磷酸，α-萘酚再和固紅TR鹽反應生成穩定的重氮化合物。通過測定在405nm吸光度的變化速率來計算ACP的活性。
前列腺酸性磷酸酶可被酒石酸抑制，血清加入酒石酸后可測得非前列腺酸性磷酸酶活性，總酸性磷酸酶活性減去非前列腺酸性磷酸酶活性得前列腺酸性磷酸酶活性。
2.生理變異
男、女性血中ACP含量無差異，新生兒ACP活性與成人相似，出生后1個月中血清酶活性甚高，然后隨年齡的增長而逐漸下降，青春期又可出現一活性峰值，至20歲降至成人水平。
3.參考值
成人總酶活性為0～9U/L，
前列腺酸性磷酸酶為0～3U/L（連續監測法）。
4.臨床意義
臨床血清ACP測定主要用于前列腺癌的輔助診斷及療效觀察指標。前列腺癌，特別是有轉移時，血清ACP可明顯升高，前列腺酸性磷酸酶更有意義。
溶血性疾病、變形性骨炎、急性尿潴留及近期作過直腸檢查者，此酶亦可輕度增高。
由于血清ACP酶活性極不穩定，活性測定的應用漸趨稀少。