比色法
國標 GB/T5009.34-2003 中規定用鹽酸副玫瑰苯胺法檢測食品中二氧化硫含量,其主要原理是利用亞硫酸鹽與四氯汞的反應生成穩定的絡合物, 再與甲醛及鹽酸副玫瑰苯胺作用生成紫紅色絡合物,在波長550 nm處測定溶液吸光度,與標準系列比較定量。
滴定法作為測定食品中微量二氧化硫的主要方法,具有操作簡單、靈敏度高、再現性好的優點,是實際檢測中最常用方法。但是該方法的線性范圍窄,對于亞硫酸鹽含量高的樣品,需對樣品稀釋后測定;其次,在該方法中使用了有毒試劑四氯汞鈉,且用量大,易對環境造成汞的污染。
另外,對于某些本身有紅色或玫瑰紅色的樣品,如葡萄酒等,則在550 nm測定波長產生干擾,并且因偏差無任何規律可循,使干擾無法扣除。為減少有毒試劑四氯汞鈉對環境的污染,消除這一不足,往往采用其他毒性較低的物質代替四氯汞鈉溶液作為二氧化硫的吸收液。用甲醛溶液吸收-鹽酸副玫瑰苯胺分光光度法測定了白砂糖中的二氧化硫。用EDTA二鈉緩沖液代替四氯汞鈉吸收液對食品中的二氧化硫進行了測定,結果與國標方法一致。
為了避免某些樣品自身顏色很深,對 550 nm處的測定波長產生干擾, 往往采用蒸餾法對樣品進行前處理。日本食品衛生協會方法中“蒸餾 - 比色法”是將樣品酸化后在氮氣流中加熱蒸餾,以氫氧化鈉溶液接收,接收液與堿性品紅和甲醛混合液進行顯色反應。