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  • 發布時間:2019-04-13 13:25 原文鏈接: 比色法血清鎂測定實驗

    實驗方法原理血清中鎂,鎘離子在堿性溶液中段與甲基麝香草酚藍染色結合,呈或藍紫色化合物加人EGTA可掩蓋離子的干擾。
    實驗步驟

    一、 實驗試劑:

    1. 堿性緩沖液:稱取無水亞硫酸鈉2g,疊氮鈉100mg,甘氨酸750mg和乙二醇-雙-(2-氨基乙醚)四乙酸 [Ethylene glycol-bis(2-aminoethyl ether)-N,N,N',N'-tetrazcetic acid 簡稱:EGTA] 90mg于小燒壞中,加lmol/L氫氧化鈉 23ml使其溶解,轉入100ml容量瓶中,加去離子水至刻度。

    2. 顯色劑:精確稱取甲基麝香草酚藍(AR)和聚乙烯吡咯烷酮(PVP)0.6g于燒壞中,加1mol/L鹽酸溶液10ml,使其溶解后轉入100ml容量瓶中,加去離子水至刻度,混勻,置棕色中保存。

    3. 顯色應用液:臨用前將上述1液和2液等量混合即可。

    4. 鎂標準液:(2mg/dL)

    二、實驗操作:取經稀鹽酸處理的去離子水清洗的干燥試管3支,標明測定標準和空白管,然后按表進行操作:

    混勻,用分光光度計600nm波長,10mm比色杯,以空白管調零讀取各管光密度值。

    三、計算:

    血清鎂mmol/L=測定管吸光度/標準管吸光度×0.823

    參考值:0.67-l.04mmol/L

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    注意事項

    1. 溶血標本對本測定有干擾,故應避免。

    2. EGTA是一個金屬絡合劑,在堿性條件下能結合鎂而不結合鎂,但濃度過高也能絡合鎂,故稱量必須準確。


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