一．畢赤酵母表達常用溶液及緩沖液的配制
1．1 各種母液的配制
10*YNB （含有硫酸銨、無氨基酸的13.4%酵母基礎氮源培養基） 4℃保存。34g酵母基礎氮源培養基（無硫酸銨）+100g硫酸銨，溶于1000ml水中，過濾除菌。
500*B （0.02%生物素 Biotin） 4℃保存 保存期為1年。20mg的生物素溶于100ml水中，過濾除菌。
100*H （0.4%Histidine 組氨酸） 4℃保存 保存期為1年。400mg的L-組氨酸溶于100ml水中，（加熱至50℃以促進溶解），過濾除菌。
10*D （20%Dextrose 葡萄糖） 保存期為1年。200g葡萄糖溶于1000ml水中，滅菌15min或過濾除菌。
10*M （5%Methanol 甲醇） 保存期為2個月。將5ml的甲醇與95ml水混勻，過濾除菌。
10*GY （10%Glycerol 甘油） 保存期為1年以上。將100ml甘油和900ml水混勻后，高壓滅菌或過濾除菌。
100*AA （0.5% of each Amino Acid，各種氨基酸） 4℃保存 保存期為1年。分別將500mg的L-谷氨酸、L-蛋氨酸、L-賴氨酸、L-亮氨酸和L-異亮氨酸溶于100ml水中，過濾除菌。
1M 磷酸鉀溶液（potassium phosphate buffer，pH6.0），將1mol/L的K2HPO4溶液132ml與1mol/L的KH2PO4溶液868ml混勻，其pH為6.0，如需調節pH，則使用磷酸和氫氧化鉀調節pH。
1.2 常用溶液及緩沖夜
1.2.1 堿裂解法抽提質粒DNA所用溶液：
溶液Ⅰ：50mmol / L glucose，100mmol / L EDTA，25mmol / L Tris－HCI (pH 8.0)
溶液Ⅱ：0.2mol／L NaOH，1％ SDS（臨用時配制）
溶液Ⅲ：29.44g KAc，11.5ml Acetic acid，加ddH2O 至100 ml。
4℃保存。
1.2.2 10% 甘油 （Glycerol）：
將100ml甘油和900ml水混勻后，高壓滅菌或過濾除菌。保存期為1年以上。
1.2.3 Rnase-H2O：
1ul Rnase 加入1ml 滅菌 dd H2O。4℃保存。
1.2.4 TE緩沖液：
10mmol / Tris-CI（pH 8．0）， lmmol / L EDTA（pH 8.0）
1.2.5 STE緩沖液：
0.1mol / L, 10mmol / L Tris-HCl (pH 8.0), 1mmol / L EDTA (pH 8.0)
1.2.6 SCE緩沖液：
1mol / L Sorbitol (山梨醇), 10mmol / L 檸檬酸鈉 ， 10mmol / L EDTA
1.2.7 1M potassium phosphate buffer （pH 6.0）：
132 ml 1M K2HPO4
868 ml 1M KH2PO4
1.2.8 50X TAE 瓊脂糖凝膠電泳緩沖液，pH 8.0（1L）：
242 g Tris
57.1 ml Acetic Acid
37.2 g EDTA
二．畢赤酵母表達的培養基配制［5］
2.1 LB（Luria－Bertani）培養基：
Trypton l％
Yeast Extract 0.5％
NaCl l％
PH 7.0
制作平板時加入 2％瓊脂粉。121℃高壓滅菌 20min。可于室溫保存。用于培養pPICZαA原核宿主菌TOP10F’時可加入Zeocin 25ug / ml。
2.2 LLB（Low Salt LB）培養基：
Trypton l％
Yeast Extract 0.5％
NaCl 0.5％
PH 7.0
制作平板時加入 2％瓊脂粉。121℃高壓滅菌 20min。可于室溫保存數月。用于培養pPICZαA原核宿主菌TOP10F’時，加入Zeocin 25ug / ml，可以4℃條件下保存1～2周。
2.3 YPD （又稱YEPD）
Yeast Extract Peptone Dextrose Medium，（Yeast Extract Peptone Dextrose Medium，酵母浸出粉/胰蛋白胨/右旋葡萄糖培養基）
Trypton 2%
dextrose (glucose) 2%
+agar 2%
+Zeocin 100 μg/ml