毛囊干細胞的分類培養

　　毛發的周期性自我更新以及生長依賴于毛囊干細胞（hair follicle stem cells，HFSCs）周期性增殖和分化。目前研究認為HFSCs 定位于毛囊外根鞘的隆突區，大致是毛囊外根鞘最外層靠近立毛肌附著點處。研究HFSCs 對于禿發的發病機制、毛囊組織工程以及干細胞或基因治療禿發方面均有重要理論和臨床意義。

　　有關毛囊干細胞分離培養的研究，目前在多數實驗室中以鼠的觸須毛囊、外科獲取的人頭皮樣本為毛囊干細胞的組織來源。樣本經中性蛋白酶（dispase II）處理，分離去除表皮，或者用胰酶/EDTA處理收集的毛囊組織，貨的單細胞懸液培養毛囊干細胞。人毛囊干細胞的分離較為困難，因為人毛囊bulge區沒有明確的形態學特征，外根鞘隆起不明顯”。其次，人毛囊干細胞缺乏特異的毛囊干細胞標記物。

　　人們利用成人枕、顳部的全層頭皮，用顯微切割方法分離出人毛囊bulge區，對分離的細胞進行CD200免疫熒光標記后，用磁珠分選的方法獲得了高純度的人毛囊干細胞。Kloepper等發現以CD200、K19作為陽性標記物，CD34、nestin為陰性標記物，可以更好地鑒定人毛囊干細胞，提示在利用于細胞標記物進行毛囊干細胞分離時，將陽性標記物與陰性標記物加以組合，分離的效果更為有效及實用。

　　有人應用CD200、frizzled受體、CD34、CD71、CDl46等一系列陽性及陰性標記物，對人毛囊bulge區進行免疫熒光標記后，為了最大數量地獲得毛囊bulge干細胞，他們又對毛囊bulge區進行了不同于傳統的橫向切片，然后用激光顯微切割法分離切片中的bulge區，得到了數量眾多的、標記物表達特征為CD200CD24CD34CD7lCDl46、具有高克隆形成率及多向分化潛能的人毛囊干細胞。