毛細管電泳色譜儀壓力進樣要求毛細管內的填充介質具有流動性,當毛細管兩端置于不同的壓力環境中時,管內溶液流動,將樣品引入。
一、進樣動力:
進樣動力有進樣端加壓(正壓)、出口端抽真空(負壓)和虹吸(重力)。
1、進樣端加壓:
采用壓縮空氣(鋼瓶氣)可實現正壓進樣,并可與毛細管清洗系統共用。多采用。
2、出口端抽真空:
負壓進樣要求控制設計特別精密,否則容易因泄露等原因出現不重復進樣。
3、虹吸:
調節進樣槽和出口槽之間的相對高度使之產生虹吸作用,將樣品引入。
二、進樣質量:
壓力進樣時,在時間t內,進入毛細管的樣品質量Q為:
Q =(ΔP×πr4Ct)/(8ηL)
式中:r為毛細管內徑,L為毛細管總長度,ΔP為管兩端的壓力差,C為樣品濃度,η為管內溶液粘度。
電動進樣的控制參數是管兩端的壓力差ΔP和進樣時間t。其中ΔP通常為0~3450Pa;t通常為1~5s,有時可達60s或更大。
利用重力進行虹吸進樣時,ΔP正比于毛細管進、出口液面的相對高度ΔH,進樣量也可由ΔH控制。
ΔP = ρgΔH
式中:ρ為緩沖液密度;g為重力加速度;ΔH通常為5~20cm,多取10cm,對應的t多為5~10s。
ΔH大,進樣快速,但毛細管上下移動幅度大,不利于控制,也不利于儀器的設計。
三、特點:
1、優點:
(1)進樣量與組分的淌度無關,不存在電動進樣中的歧視效應。進樣量不受樣品基質的影響,應用廣泛。
(2)若嚴控樣品粘度和溫度,則進入毛細管的樣品質量恒定。
2、缺點:
壓力進樣選擇性差,樣品和背景同時被引入毛細管內,對后續分離可能產生影響。