毛細管電泳色譜儀進樣方式有電動進樣、壓力進樣和擴散進樣。
一、電動進樣:
1、方法:
在毛細管的陽極端接觸緩沖液前,先置于樣品溶液中,并在很短時間內加進樣電壓,使樣品通過電遷移進入毛細管。
2、特點:
(1)對毛細管內的填充介質沒有特殊限制,屬普適性進樣方法,可實現自動化操作。
(2)進樣裝置簡單,不需附加設備,介質粘度很高時使用更有利。
(3)電動進樣是毛細管凝膠電泳的*進樣方式。因為在凝膠狀態下,壓力進樣和擴散進樣都很困難。
(4)可用于痕量富集。但樣品溶液的離子強度必須保持恒定,否則在該點的電壓會急劇變化。
二、壓力進樣:
壓力進樣是最常用的進樣方式。
1、方法:
(1)進樣端加壓:
采用壓縮空氣(鋼瓶氣)可實現正壓進樣,并可與毛細管清洗系統共用。多采用。
(2)出口端抽真空:
負壓進樣需要特別精密的控制設計,容易因泄露等原因出現不重復進樣。
(3)虹吸:
調節進樣槽和出口槽之間的相對高度使之產生虹吸作用,將樣品引入。
2、特點:
(1)若嚴控樣品粘度和溫度,則進入毛細管的樣品質量恒定。
(2)在進樣中沒有組分歧視。
三、擴散進樣:
1、方法:
利用濃度差擴散原理,當將毛細管插入樣品溶液時,樣品分子因在管口界面存在濃度差而向管內擴散。
2、特點:
(1)對毛細管內的填充介質沒有任何限制,屬普適性進樣方法。
(2)擴散進樣具有雙向性。在樣品分子進入毛細管的同時,區帶中的背景物質也向管外擴散,可得到畸變程度較小(與背景差別不大)的初始區帶,能抑制背景干擾,提高分辨率。擴散與遷移速度和方向無關,可抑制進樣偏向,提高定性定量的可靠性。