⑴稱取一定量的載體于蒸發皿中，加2倍于載體體積的低沸點溶劑（氯仿丙酮、三氯甲烷等），使之溶解。
⑵取適量的固定液，倒入蒸發皿中，拌勻。注意應使載體全部覆蓋在液面下，于紅外燈下緩緩加熱，不時輕輕攪拌，待溶液全部揮發。
⑶先將柱的一端用玻璃毛輕輕堵上，接上吸濾真空泵，柱的另一端接上漏斗，將填充劑從漏斗加入，同時啟動真空泵，不時輕敲柱子各部，以使填充均勻。裝滿后，關閉真空泵，取下色譜柱，將加樣的一端也填上一小團玻璃毛。
⑷將柱裝入色譜柱中，在通載氣前，先將爐溫升至略高于操作溫度，保持約1h，以使固定液受熱熔化或粘度減小，在載體表面流布均勻，然后再通入載氣，使色譜柱在操作溫度下通載氣數小時。