香蘭素(Vanillin),又名香草醛,是一種廣泛使用的可食用香料或醫藥中間體,可采取內標法測定奶茶中香蘭素的含量。
使用內標法時,在樣品中加入一定量的標準物質,它可被色譜柱所分離,又不受試樣中其它組分峰的干擾,只要測定內標物和待測組分的峰面積與相對響應值,即可求出待測組分在樣品中的百分含量。內標物應當是一個能得到純樣的己知化合物,和被分析的樣品組分有基本相同或盡可能一致的物理化學性質(如化學結構、極性、揮發度及在溶劑中的溶解度等)、色譜行為和響應特征,是被分析物質的一個同系物。當然,內標物必須能與樣品中各組分充分分離并不發生反應。
方法所需儀器與試劑:氣相色譜儀,10ul進樣針,移液槍;
香蘭素儲備樣(稱取香蘭素0.5022g,以氯仿定容到50ml容量瓶);
2-甲氧基苯酚儲備樣(稱取2-甲氧基苯酚0.4987g,以氯仿定容到50ml容量瓶);
香蘭素未知樣,氯仿。
測定方法:
配置標準溶液:以移液槍量取100,200, 300,400ul香蘭素儲備液 和200,200, 200,200ul 2-甲氧基苯酚儲備液 于5ml容量瓶中,用氯仿定容。
配置未知溶液:以移液槍量取200ul香蘭素未知液和200ul 2-甲氧基苯酚儲備液于5ml容量瓶中,用氯仿定容。
氣相色譜條件:進樣口:氣化溫度:250℃, 分流比:10:1;
色譜柱:流速:2.0ml/min;
柱溫箱:120℃(保持1min),10℃/min升到200℃
檢測器:基座溫度:250℃,H2:45ml/min,
Air:450ml/min,N2:40ml/min. 保存。
以以上方法測定標樣及未知樣,記錄實驗數據(保留時間及峰面積),做出內標標準曲線,以內標法計算未知樣中香蘭素含量。
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