一、游離脂肪酸
取樣品，于100mL 離心管中，加入二氯甲烷－甲醇溶液( V/V = 2∶1)，0.0001g，然后勻漿、4000r /min 條件下離心5min； 取出離心管后，分別取下層溶液和上層溶液于具塞試管中，加入20%的0.88% KCl 溶液后混勻，過夜分層后取下層液體真空干燥，所得物質即為粗脂肪。當得到總脂肪后，加入酮－甲醇溶液( v /v = 2∶1) 和Amberlyst－A26 陰離子交換樹脂于恒溫振蕩器中震蕩2h 后去除溶液，用丙酮－甲醇溶液洗5 次( 共用20mL) ，最后在通風櫥中用氮氣將交換樹脂吹干后待甲酯化 [3] 。
二、甲酯化
在圓底回流瓶中加入提取的油脂或吸附后的樹脂并加5mL 0.5mol /L 的氫氧化鈉甲醇溶液混勻后連接回流裝置。在100℃水浴中加熱回流5min，然后加3mL 三氟化硼－ 10% 甲醇溶液反應5min，最后加入2mL 正己烷回流萃取2min，取出冷凝裝置將回流瓶冷卻至室溫后加NaCl 飽和溶液混合，并將其移入具塞試管中，反復沖洗回流瓶3 次將洗液一并倒入具塞試管中靜置。待分層后吸取上層溶液( 正己烷層) 約lmL 于樣品瓶中，于4℃下保存，以備氣相色譜儀分析。
三、GC 條件
氣相毛細管柱為Agilent SP－2560，100m × 0.25mm i.d × 0.2μm，柱初始溫度60℃，以8℃ /min 升溫至180℃，1.5℃ /min 升溫至240℃，保持3min； 氣化室溫度250℃； 載氣: N2； 柱流速:1mL /min； 分流比: 30∶1； 進樣量1μL。
四、數據分析
結果采用與標準品對照法定性及內標定量，并以平均值± 標準偏差( mean ± SD) ( n = 5) 的形式表示。數據采用SPSS 16.0 統計分析軟件進行數據分析，利用方差分析( One－Way ANOVA) 檢驗數值間的差異顯著性，當p < 0.05 時視為具有顯著性差異。