氨基酸序列測定實驗——輔助方案

蛋白質樣品

1 mol／L NaHCO3 （可選）100％ 冰冷乙醇(不含變性劑 USP 級)樣品緩沖液 0.1％ （V／V）焦寧 Y 染料

超濾濃縮器／Speedvac蒸發器拉細的巴斯德吸管／凝膠加樣吸頭1.5 ml 微量離心管離心機

1. 必要時，用1 mol/L NaHCO₃將蛋白質樣品的鹽濃度調至 > 100 mmol/L。

2. 用超濾濃縮（按廠商說明）或真空濃縮（關鍵是當釋放真空時，不要引入空氣中的殘屑）將樣品體積濃縮至 50~100 μl, 移入 1.5 ml 微量離心管。

3. 樣品加入 9 倍體積的冰冷 100％ 乙醇。在干冰中放置 1 h，或 -20°C 過夜。許多樣品在這步就可以永久保存了。

4. 在最大速度下微量離心 15 min, 用拉細的巴斯德吸管或凝膠加樣吸頭吸去上清，保留沉淀。

5. 加入 10 ml 樣品緩沖液，并用吸液器上下抽吸以溶解樣品。在沸水浴中煮沸 3 min。

6. 樣品加入 1μl 0.1％ 焦寧 Y （示蹤染料），加樣于微型凝膠。