取本品適量，精密稱定，加流動相A溶解并定量稀釋制成每1mL中約含3mg的溶液，作為供試品溶液；另取氨芐西林對照品適量，精密稱定，加流動相A溶解并定量稀釋制成每1mL中約含30μg的溶液作為對照溶液。照高效液相色譜法（附錄VD）測定，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動相A為12%醋酸溶液-0.2mol/L磷酸二氫鉀溶液-乙腈-水（0.5 ：50 ：50 ：900) ；流動相B為12%醋酸溶液-0.2mol/L磷酸二氫鉀溶液-乙腈-水（0.5 ：50 ：400 ：550)；檢測波長為254nm。先以流動相A-流動相B（85 ：15）等度洗脫，待氨芐西林峰洗脫完畢后立即按下表進行線性梯度洗脫。取氨芐西林系統適用性對照品適量，加流動相A溶解并稀釋制成每1 mL中約含2mg的溶液，取20μL注入液相色譜儀，記錄的色譜圖應與標準圖譜一致，取對照溶液20μL注入液相色譜儀，調節檢測靈敏度，使主成分色譜峰的峰高約為滿量程的20%。立即精密量取供試品溶液與對照溶液各20μL，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。供試品溶液色譜圖中如有雜質峰，單個雜質峰面積不得大于對照溶液主峰面積（1.0%) ，各雜質峰面積的和不得大于對照溶液主峰面積的3倍（3.0%），供試品溶液色譜圖中任何小于對照溶液主峰面積0.05倍的峰可忽略不計。