沙門氏菌顯色培養基的快速檢測與分離應用

　　沙門氏菌屬是一大群寄生于人類和動物腸道內，生化反應和抗原構造相似的革蘭氏陰性桿菌，有的專對人類致病，有的只對動物致病，也有對人和動物都致病，這些統稱為沙門氏菌。

　　沙門氏菌目前已經發現1800種以上，按抗原成分可分為甲、乙、丙、丁、戊等基本菌型。其中與人類疾病有關的主要有甲組的副傷寒甲桿菌，乙組的副傷寒乙桿菌和鼠傷寒桿菌，丙組的副傷寒丙桿菌和豬霍亂桿菌，丁組的傷寒和腸炎桿菌。

　　此菌可引起禽傷寒、雞白痢、豬霍亂、鼠傷寒沙門氏菌病、豬副傷寒、馬流產沙門氏菌病等疾病。致病性最強的是豬霍亂沙門氏菌，其次是鼠傷寒沙門氏菌和腸炎沙門氏菌。

　　感染沙門氏菌或食用被帶菌者糞便污染的食品，可使人發生食物中毒。據統計在世界各國的種類細菌性食物中毒中，沙門氏菌引起的食物中毒常列榜首。

　　原理：

　　蛋白胨和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;氯化鈉可維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養基的凝固劑;抑菌劑抑制革蘭氏陽性菌，增強培養基的抑制雜菌的能力;混合色素分別與沙門氏菌和大腸菌群所對應的酶發生特異性反應，水解底物，釋放出顯色基團，在淡黃色平板上沙門氏菌產生品紅色的菌落，大腸菌群產生藍綠色的菌落。

　　培養基配方(每升)：

　　蛋白胨19.6g

　　酵母膏粉3g

　　氯化鈉5g

　　抑菌劑1.5g

　　瓊脂12g

　　混合色素6.4g

　　最終pH 7.0±0.2

　　使用方法：

　　1、稱取本培養基47.5g，用1000ml蒸餾水或純水溶解，混合均勻加熱至100℃，并按常規不斷攪拌直至完全溶解(不能持續高溫加熱，建議不要重復煮溶)，不需高壓滅菌，冷至50℃，傾注滅菌平皿。

　　2、按國家標準、SN標準、FDA標準或其它方法制備樣品液與增菌液。

　　3、建議使用二步增菌法：

　　(1)前增菌：將處理過的樣品25g置于225mL緩沖蛋白胨水中，混合均勻后37℃培養6～8h;

　　(2)選擇性增菌：取前增菌液1mL加入到9mL四硫磺酸鈉煌綠增菌液(TTB)中，混合均勻后37℃培養18～24h;

　　4、用接種環取增菌液一環，劃線接種于沙門氏菌顯色平板上，置于36±1℃培養18-24小時。

　　5、觀察結果。挑取顯色平板上呈品紅色，扁平透明，邊緣光滑，直徑約2mm的可疑菌落進行進一步的試驗。

　　6、可使用MicrogenTMGN-ID或API20E或生化管試驗，對疑似沙門氏菌菌落進行生化鑒定。

　　質量控制：

　　本品傾注平皿后呈淡黃色，下列菌株接種后于36±1℃培養18—24h生長情況如下表。

菌 名　　　　　　　　菌 號　　　　生長狀況　　 培養特征

　　鼠傷寒沙門氏菌　　CMCC50115 　　　良好　　　　菌落品紅色

　　大腸埃希氏菌　　　ATCC25922　　　良好　　　　菌落藍綠色

　　奇異變形桿菌　　CMCC(B)49005　　　良好　　　　菌落無色

　　糞腸球菌　　　　　ATCC29212　　　受抑制　　　　----

　　貯 存：貯存于避光、陰涼干燥處，用后立即旋緊瓶蓋。貯存期二年。

　　規 格：可配置1L的培養基干粉。