1、比色法：
（1）乳酸鉀、乳酸鈉也可作為LDH底物，但因其為水溶液，含量不夠準確，且保存不當易產生酮酸類物質，抑制酶促反應。而乳酸鋰為固體，穩定，易于稱量。
（2）除二乙醇胺緩沖液外，也可用Tris或焦磷酸緩沖液，避免了原金氏法中甘氨酸緩沖液對LDH的抑制作用，提高了陽性檢出率。
（3）比色應在5～15min內完成，否則吸光度降低。
（4）結果>2500U時，可用生理鹽水稀釋標本后再測，其結果乘以稀釋倍數。
2、連續監測法：
（1）標本勿溶血，當溶血達Hb 0.8g/L時，LDH活性可升高58%。
（2）標本于室溫（25℃）保存，2天內酶活性穩定，冰箱保存酶活性降低，-20℃過夜LDH3、LDH4則全部失活。
（3）用血清或肝素抗凝血漿測定結果滿意，草酸鹽可抑制LDH活性。
（4）復溶后溶液變濁或初始吸光度>0.5應棄去。
（5） 利用正逆雙向反應均可測定乳酸脫氫酶活性，但因反應溫度、底物和緩沖液濃度不同，其參考區間也有差異。以乳酸和NAD為底物，在340nm監測吸光度增高速率為正向反應，以LD-L表示；以丙酮酸和NADH為底物，監測340nm吸光度下降速率為逆向反應，以LD-P表示。正逆反應兩法相比，LD-L法的主要優點是：A.正向反應底物液的穩定性比逆向反應的穩定性大，前者冰箱可保存6個月以上，而后者僅幾天；B.速率反應的線性范圍（吸光度對監測時間t作圖）較寬；C.重復性比LD-P好。由于逆向反應速度比正向反應速度快，其參考值約為LD-L的2倍。